益氣活血法抗腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制研究.pdf

1、研究目的:通過文獻(xiàn)綜述,系統(tǒng)掌握中醫(yī)關(guān)于缺血性中風(fēng)治療學(xué)問題的理論和現(xiàn)代研究進(jìn)展,使我們的研究工作盡可能立足于學(xué)科前沿.通過實(shí)驗(yàn)觀察,系統(tǒng)研究中醫(yī)益氣活血法在不同層次、不同靶點(diǎn)、不同時(shí)間段對(duì)缺血性中風(fēng)的作用情況,并以神經(jīng)細(xì)胞凋亡為切入點(diǎn),在分子生物學(xué)層次上闡明其作用機(jī)制,力求為臨床合理運(yùn)用益氣活血法治療缺血性中風(fēng)進(jìn)而提高臨床療效,為開發(fā)中藥新藥提供更科學(xué)的理論與實(shí)驗(yàn)依據(jù).主要研究方法:宏觀研究方法是:對(duì)模型鼠存活率、體重、神經(jīng)系統(tǒng)體征、

2、氣虛證、血瘀證的觀察.微觀研究方法是:對(duì)模型鼠血液流變學(xué)、HE、電鏡、流式細(xì)胞術(shù)、TUNEL法、酶標(biāo)法、免疫組化染色、原位雜交的檢測(cè).動(dòng)態(tài)研究方法是:采用饑餓、勞累、高脂飲食等多因素復(fù)合制出氣虛血瘀證模型,然后用線栓法阻斷大腦中動(dòng)脈制作出局灶性腦缺血再灌注模型,隨機(jī)分為缺血再灌注1天、3天、7天假手術(shù)組、模型組、益氣組、活血組、益氣活血組,動(dòng)態(tài)觀察益氣活血法對(duì)缺血再灌注損傷的保護(hù)作用和抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)理.數(shù)學(xué)研究方法是:圖像分析

3、系統(tǒng)和SPSS 11.0 for Windows軟件處理.結(jié)論:實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,益氣法、活血法、益氣活血法對(duì)腦缺血再灌注損傷均有明顯療效,以益氣活血法療效最為顯著.通過流式細(xì)胞儀對(duì)模型鼠缺血半暗帶神經(jīng)細(xì)胞凋亡率進(jìn)行定量研究,TUNEL染色對(duì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡生化特性的定性研究,及電鏡對(duì)海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡形成過程的動(dòng)態(tài)觀察,結(jié)果表明,益氣法、活血法、益氣活血法有較好的抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用,以益氣活血法作用效應(yīng)最為顯著.通過對(duì)腦組織NO含量