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文檔簡介
1、目的:
建立血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)H9c2心肌細胞肥大模型,并觀察各組心肌細胞泛素化蛋白水平的變化。
方法:
血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)H9c2心肌細胞肥大模型建立:H9c2心肌細胞在含10%FBS的高糖DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)48 h,消化傳代后,分別以3個AngⅡ濃度組(10-8、10-7、10-6mol/L)分別處理不同時間(0、6、12、24、48、72h),另設(shè)一個空白對照組;BCA法測量其總蛋白含量;并測量相同面積
2、下心肌細胞數(shù),計算心肌細胞相對表面積。
觀察泛素化結(jié)蛋白水平的變化。常規(guī)傳代培養(yǎng)H9c2心肌細胞,分別以4個AngⅡ濃度組(0、10-8、10-7、10-6mol/L)分別處理不同時間(0、6、12、24、48、72h),Western blot法及免疫組織化學(xué)法檢測泛素化結(jié)蛋白的表達情況。
結(jié)果用x±S.E.M表示,用SPSS14.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理,兩組數(shù)據(jù)比較統(tǒng)計學(xué)分析采用兩個獨立樣本的t檢驗。
結(jié)
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