普羅考對高脂誘導的IR大鼠的治療作用及機理研究.pdf

1、目的:通過高脂飲食構建大鼠胰島素抵抗（insulinresistance，IR）模型，探討脂肪代謝、炎癥反應、氧化應激、c-Jun氨基末端激酶1（JNK1）在IR發(fā)病機制中的作用;觀察普羅布考治療IR大鼠的療效及對肝臟JNK1表達的影響;探討普羅布考改善IR的作用機制。
　　 方法:將40只雄性SD大鼠隨機分為正常飲食組(NG)16只，予以普通飼料喂養(yǎng);高脂飲食組(HG)24只，予以高脂飼料喂養(yǎng);第8周末兩組隨機處死8只大鼠鑒定

2、成模，分別為NG8W和HG8W。第9周開始將高脂飲食組大鼠隨機分為2組:普羅布考組(PB)和HG14W，每組8只，繼續(xù)給予高脂飼料喂養(yǎng)。PB均予以普羅布考500mg/(Kg.d)（以0.5％羧甲基纖維素鈉配制的5％普羅布考混懸液）灌胃6周;HG14W與NG14W均予以0.5％羧甲基纖維素鈉1ml/100g體重灌胃6周;各組大鼠處死前禁食12h并稱重;摘眼球取血，離心分離血清，用于測定血清谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶(AST)、甘油三

3、酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、空腹血糖(FBS)、血清胰島素(FINS)、游離脂肪酸(FFAs)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、脂聯(lián)素(Adp);計算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR);游離肝臟并稱重，計算肝指數(shù);取小塊肝組織剪碎，制成10％的肝組織勻漿，用于測定肝勻漿MDA、SOD含量。取大鼠肝右葉組織石蠟切片，用免疫組織化學方法檢測JNK1在肝組織中的表達。
　　 結果:(1)與NG相比，HGSD大鼠

4、體重、肝指數(shù)、血清ALT、AST、TG、TC、LDL、FINS、HOMA-IR、FFAs、TNF-α水平及肝勻漿MDA均明顯升高，血清Adp及肝勻漿SOD則明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義（均p＜0.05）;而FBS沒有明顯變化(p＞0.05);(2)PB組大鼠的體重、肝指數(shù)、血清ALT、AST、LDL、TG、TC、FINS、HOMA-IR、FFAs、TNF-α水平及肝勻漿MDA均低于HG14W，Adp及肝勻漿SOD則有所上升，差異有統(tǒng)計學意

5、義（均p＜0.05），與NG14W比較，上述指標除FINS、Adp、MDA外，其他均存在統(tǒng)計學意義上的差異;(3)JNK1蛋白免疫組織化學顯示:光鏡下觀察，NG組大鼠肝組織未見明顯JNK1抗體陽性細胞;HG8W、HG14W大鼠肝臟則有較強的JNK1表達，表現(xiàn)為細胞漿和/或細胞核內彌漫性棕黃色或棕褐色顆粒，其免疫組化評分與同期的NG組大鼠相比均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.001）;PB大鼠的肝臟JNK1表達較HG14W弱，表現(xiàn)為陽性顆粒的著色

6、程度及陽性細胞數(shù)均較少，差異有統(tǒng)計學意義(均p＜0.001)，但仍較NG14W強，表現(xiàn)為陽性顆粒的著色程度及陽性細胞數(shù)均較多，差異有統(tǒng)計學意義（均p＜0.001）;(4)HOMA-IR與肝臟JNK1表達水平成正相關;肝臟JNK1的表達分別與血清TNF-α、FFAs、肝勻漿MDA成正相關，與血清Adp、肝勻漿SOD成負相關;血清TNF-α、FFAs成正相關，但兩者與Adp成負相關;血清TNF-α與肝勻漿MDA成正相關，與SOD成負相關。<

7、br>　　 結論:
　　 1.SD大鼠持續(xù)高脂飲食喂養(yǎng)8周成功構建了肥胖IR模型，該模型同時伴有轉氨酶及血脂的升高;
　　 2.高脂飲食誘導SD大鼠IR的可能分子機制為:升高FFAs，誘導脂肪細胞因子改變（增加TNF-α、減少Adp），產生OS及脂質過氧化，并共同作用于JNK信號通路，使肝組織JNK1蛋白表達升高，減弱INS的生理作用，導致IR;
　　 3.普羅布考治療高脂誘導IR大鼠6周后能部分改善IR，其機