mir-29a促進結直腸癌遠處轉移的機制研究.pdf

1、湯文濤miR29a促進結直腸癌遠處轉移的機制研究中文摘要第一部分miR29a促進結直腸癌遠處轉移的研究目的和意義：遠處轉移是結直腸癌(CRC)患者死亡的主要原因。腫瘤遠處轉移是一個復雜的多步驟過程，包括原發(fā)腫瘤的生長，血管生成，癌細胞侵襲，滲入血管或淋巴管，外滲到遠處的器官以及轉移瘤的定居和生長。大量研究證實miRNA在CRC遠處轉移過程中起重要作用。本實驗分析miR一29a在CRC患者臨床標本中的表達及miR29a對CRC細胞惡性表型

2、的影響。評估m(xù)iR一29a在CRC患者診斷或預后判斷的應用價值。研究方法：運用熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應(qRTPCR)檢測68例CRC患者腫瘤組織中miR一29a的表達，并分析miR一29a表達水平與臨床病理特征的關系。然后將miR一29amimics和antmiR一29a分別轉染CRC細胞系LoVo和HCT116。運用transwell小室分析miR一29a對CRC細胞侵襲的影響，運用蛋白質印跡(Westernblot)檢測基質金屬

3、蛋白酶2和9(MMP2／9)蛋白的表達。最后，利用慢病毒技術構建miR29a穩(wěn)定轉染的LoVo細胞株，建立裸鼠CRC肝轉移模型，體內水平分析miR29a對CRC遠處轉移的影響。研究結果：qRTPCR結果顯示miR29a表達水平與CRC肝轉移正相關，而與其它臨床病理特征均無顯著顯著相關性。細胞侵襲實驗顯示miR29amimics促進LoVo和HCT116細胞的侵襲，而anti—miR29a抑制LoVo和HCT116細胞侵襲。Western

4、blot結果顯示miR一29amimics促進MMP2和MMP9蛋白的表達，而antmiR一29a抑制MMP2和MMP9表達。裸鼠CRC肝轉移模型顯示miR一29a促進CRC體內遠處轉移。結論：miR。29a表達水平與CRC遠處轉移正相關。miR一29a促進CRC細胞侵襲和遠處轉移，是CRC潛在的癌基因。湯文濤miR29a促進結直腸癌遠處轉移的機制研究3PARTIAbstractTheroleofmiR29aondistantmetas

5、tasisofcolorectalcancerobjectiveDistancemetastasisisamajorcauseforthedeathofcolorectalcancer(CRC)patientsThereisincreasingevidenceofmiRNAsinvolvementinCRCmetastasisInthisstudyweanalyzedtheexpressionlevelofmiR一29ainCRCtis

6、suesandtheinfluenceofmiR_29aonmalignantphenotypeofCRCinordertoevaluatetheapplicantvalueofmiR一29aforCRCdiagnosisandprognosisMethodsQuantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction(qRTPCR)wasusedtodetecttheexpressio

7、nlevelofmiR一29ain68casesofCRCtissues，andtheassociationofmiR一29aexpressionlevelandclinical—pathologicalfeatureswasanalyzedThenmiR29amimicsandantmiR一29awastransfectedintoCRCcelllines，LoVoandHCT116respectivelyTranswellchamp

8、erswereusedtoanalyzetheinfluenceofmiR一29aonCRCcellinvasion，andwestemblotwascarriedouttodetecttheexpressionofMatrixmetallopeptidase2／9(MMP2／9)LoVocellsectopicallyexpressingmiR29aconductedbylentivirusinfectionwereinjectedi

9、ntotheCecalwallofnudemicetoconstructCRClivermetastasismodelandanalyzetheinfluenceofmiR29aonCRCmetastasisinvivesultsTheresultsofqRTPCRrevealedthattheexpressionlevelofmiR一29awaspositivecorrectedwithCRClivermetastasis，while

10、therewasnosignificantassociationbetweenmiR29aandotherclinicalpathologicalfeaturesTranswellassaydemonstratedthatmiR一29apromotedcellinvasionbothinLoVoandHCT116cells，whileanti—miR一29ainhibitedcellinvasionWesternblotrevealed