版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:建立成年大鼠心室肌細胞分離和培養(yǎng)模型,以成年鼠心肌細胞為觀察對象,探討缺血后處理(Ischemic postconditiong,IPTC)與ATP敏感性鉀通道開放劑吡那地爾(pinacidil)藥物后處理對成年鼠心室肌細胞ATP敏感鉀通道亞基表達的影響。
方法:選擇16-20周的成年SD大鼠,應(yīng)用Langendorff離體心臟灌注裝置,分離培養(yǎng)心肌細胞。將大鼠心肌細胞隨機分為正常組(Nor),對照組(con),缺血
2、后處理組(IPTC),吡那地爾(Pina)后處理組,格列本脲(glibenclamide,Gly)拮抗IPTC組(Gly+IPTC),格列本脲拮抗吡那地爾組(Gly+Pina)。分離后的心肌細胞培養(yǎng)18小時,除Nor組持續(xù)培養(yǎng)外,其余各組均缺氧45min,復(fù)氧60min。Con缺氧45min,復(fù)氧60min;IPTC組缺氧45min后即刻復(fù)氧-缺氧循環(huán)3次各3min,繼續(xù)復(fù)氧60min;Pina組缺氧45min后于培養(yǎng)基中加入吡那地爾(
3、100μM)處理5min,再復(fù)氧60min;Gly+IPTC組缺氧45min后格列本脲(10μM)處理5min,再行復(fù)氧-缺氧后處理,繼續(xù)復(fù)氧60min;Gly+Pina組缺氧45min后格列本脲(10μM)處理5min,再行吡那地爾(100μM)后處理5min,繼續(xù)復(fù)氧60min。心肌細胞經(jīng)以上不同條件處理后,提取RNA,RT-PCR檢測ATP敏感鉀通道亞基基因變化情況;其它條件不變,心肌細胞復(fù)氧180min后,提取蛋白質(zhì),Weste
4、rn-blot檢測ATP敏感鉀通道亞基蛋白變化情況。
結(jié)果:
1.分離的成年大鼠心肌細胞活性比例約80%-90%,顯微鏡下觀察細胞呈桿狀,橫紋清晰,有間斷不規(guī)則的自主收縮。
2.ATP敏感鉀通道亞基基因表達情況 Kir6.1:Con組表達量高于Nor組;IPTC組和Pina組表達明顯高于Con組,且IPTC組較Pina組表達量升高;Gly+IPTC組較IPTC組表達量降低,同時Gly+Pina組
5、較Pina組表達量也降低。SUR1:Con組表達量低于Nor組;IPTC組和Pina組表達明顯低于Con組,IPTC組較Pina組表達量無明顯變化;Gly+IPTC組較IPTC組表達量升高,同時Gly+Pina組較Pina組表達量也升高。Kir6.2與SUR2變化情況與Kir6.1相同。
3.ATP敏感鉀通道亞基蛋白表達情況Kir6.1:Con組表達量高于Nor組(P<0.05);IPTC組和Pina組表達明顯高于Con組
6、(p<0.05),IPTC組較Pina組表達量明顯升高(P<0.05);Gly+IPTC組較IPTC組表達量降低(p<0.05),同時Gly+Pina組較Pina組表達量也降低(p<0.05).Kir6.2與SUR2變化情況與Kir6.1相同.SUR1無特異性表達。
結(jié)論:
1.缺氧后處理能顯著提高ATP敏感鉀通道亞基Kir6.1、Kir6.2和SUR2的表達,能夠降低SUR1的mRNA表達,這些效應(yīng)能被AT
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 七氟烷后處理對老年大鼠缺血心肌線粒體ATP敏感性鉀通道和細胞凋亡的影響.pdf
- 遠端創(chuàng)傷和缺血對心肌細胞膜ATP敏感性鉀離子通道表達的影響.pdf
- 線粒體ATP敏感性鉀通道在腺苷抗心肌細胞肥大中的作用.pdf
- 小鼠胚胎心肌細胞ATP敏感性鉀通道(KATP)的發(fā)育依賴性研究.pdf
- 降鈣素基因相關(guān)肽對大鼠心肌細胞ATP敏感性鉀通道、L型鈣通道和動作電位時程的影響.pdf
- ATP敏感性鉀通道對大鼠前脂肪細胞增殖分化影響及其機制.pdf
- 右美托咪定對大鼠心室肌細胞膜ATP敏感性鉀通道電流的影響.pdf
- 硫化氫后處理激活線粒體ATP敏感性鉀通道和PI3K-Akt保護缺血大鼠心肌.pdf
- ATP敏感性鉀通道在羥考酮后處理減輕大鼠心肌缺血再灌注損傷中的作用.pdf
- 容積敏感性氯通道對血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)心肌細胞肥大的作用.pdf
- 在心肌缺血-再灌注中IMD對ATP敏感性鉀通道.pdf
- 線粒體ATP敏感性鉀通道激活延緩大鼠心肌缺血引起的細胞間電脫耦聯(lián).pdf
- 化學(xué)預(yù)處理對腦缺氧損傷的保護機制與線粒體ATP敏感性鉀通道的關(guān)系.pdf
- 線粒體ATP敏感性鉀通道開放劑后處理對大鼠肺缺血再灌注損傷的保護作用.pdf
- 后處理對大鼠心肌細胞鈣網(wǎng)蛋白表達的影響.pdf
- 鈣激活鉀通道及ATP敏感性鉀通道在缺氧性肺血管收縮中的作用.pdf
- ATP敏感性鉀通道對膠質(zhì)瘤細胞增殖調(diào)控機制的研究.pdf
- 缺血與藥物后處理對成年鼠心肌細胞鈣敏感受體的影響.pdf
- 肌漿網(wǎng)鈣-ATP酶及線粒體ATP敏感性鉀通道介導(dǎo)的預(yù)適應(yīng)心肌保護作用.pdf
- ATP敏感性鉀通道開放劑對離體大鼠心臟的保護作用.pdf
評論
0/150
提交評論