前哨淋巴結(jié)檢測(cè)及腫瘤-睪丸抗原表達(dá)與喉鱗癌侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)研究.pdf

1、本研究分為二部分： 第一部分、前哨淋巴結(jié)檢測(cè)對(duì)喉癌治療的臨床應(yīng)用價(jià)值 目的：分析99m锝—硫膠體(Technetium sulfur colloid，99Tcm-SC)顯像的核素法、術(shù)中藍(lán)染法以及核素法與藍(lán)染法結(jié)合的聯(lián)合法對(duì)喉癌前哨淋巴結(jié)(Sentinel Lymph Nodes，SLN)檢測(cè)率，探索有效的喉癌SLN的檢測(cè)方法；了解不同類(lèi)型喉癌的SLN的分布特征，為cN0期喉癌的頸淋巴結(jié)治療提供依據(jù)。研究18F-氟代脫氧

2、葡萄糖(18F-fluorodeoxyglucose，18F-FDG)SPECT-CT顯像對(duì)喉癌原發(fā)腫瘤的診斷、臨床分期、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的臨床價(jià)值。 方法：41例cN0喉癌患者術(shù)前使用軟性?xún)?nèi)鏡噴灑管在腫瘤周?chē)⑸?9Tcm-SC，進(jìn)行SLN顯像。注射99Tcm-SC后每15分鐘進(jìn)行平面顯像和SPECT-CT顯像直到SLN顯影。手術(shù)中在注射99Tcm-SC的部位注射亞甲藍(lán)，并用γ探針探測(cè)放射性“熱點(diǎn)”。將手術(shù)切除的SLN及頸清掃標(biāo)

3、本行送病理檢查。另外，5例喉癌患者術(shù)前行18F-FDGSPECT-CT顯像，第5例患者術(shù)前一天行99Tcm-SC顯像。 結(jié)果： (1)核素法、藍(lán)染法和聯(lián)合法對(duì)SLN的檢出率分別為87.80％、70.73％和92.68％有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。核素法、藍(lán)染法和聯(lián)合法檢出SLN的數(shù)目有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，核素法和聯(lián)合法(P＜0.05)與藍(lán)染法和聯(lián)合法(P＜0.01)檢出SLN的數(shù)目有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，

4、核素法和藍(lán)染法差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。聯(lián)合法檢測(cè)聲門(mén)上型、聲門(mén)型和貫聲門(mén)型喉癌的SLN位于Ⅱ區(qū)和Ⅲ區(qū)，聲門(mén)下型位于Ⅵ區(qū)。聲門(mén)上型SLN檢出率為90.90％(20/22)，Ⅲ區(qū)SLN檢出率為58.97％(23/39)，Ⅱ區(qū)SLN檢出率為41.03％(16/39)。聲門(mén)型SLN檢出率為94.12％(16/17)，Ⅲ區(qū)SLN檢出率為85.71％(18/21)，Ⅱ區(qū)SLN檢出率為14.29％(3/21)。病理結(jié)果示9例患者有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

5、，占22.00％。 (2)5例患者術(shù)前行18F-FDGSPECT-CT顯像，提示喉部惡性病變。第5例患者聯(lián)合99Tcm-SC顯像，提示SLN有轉(zhuǎn)移。 結(jié)論：核素法和染料法均可探測(cè)喉癌的SLN，聯(lián)合法探測(cè)SLN的檢測(cè)率高于核素法、染料法，因而應(yīng)用聯(lián)合法探測(cè)cN0期喉癌的SLN是有效和可行性的方法。對(duì)于聲門(mén)上型和聲門(mén)型cN0期喉癌術(shù)中側(cè)重Ⅲ區(qū)和Ⅱ區(qū)的頸部淋巴結(jié)清掃。18F-FDGSPECT-CT顯像有助于喉癌原發(fā)腫瘤的診斷，

6、可為術(shù)前分期和進(jìn)一步的治療提供可靠依據(jù)。 第二部分、腫瘤-睪丸抗原的表達(dá)與喉癌臨床特征相關(guān)性的研究 目的：了解不同分期喉癌患者手術(shù)前后的腫瘤-睪丸抗原(cancer-testisantigen，CTA)家族中的MAGE-A1、MAGE-A3、NY-ESO-1、SSX-2和SSX-4的血清學(xué)濃度變化情況，篩選喉癌診斷的CTA血清標(biāo)志物；從蛋白水平了解這些CTA家族成員在喉癌組織及癌旁組織中的表達(dá)水平，分析這些指標(biāo)與喉癌臨床

7、特征的相關(guān)性；并進(jìn)一步探討外科切緣的可行性。 方法：與鱗狀上皮轉(zhuǎn)化及分化的標(biāo)志(CK-13、CK-19)比較，(1)采用ELISA法檢測(cè)25例喉鱗患者手術(shù)前、手術(shù)后血清中的MAGE-A1、MAGE-A3、NY-ESO-1、SSX-2和SSX-4，并進(jìn)一步檢測(cè)46例喉鱗患者手術(shù)前組、35例喉鱗患者手術(shù)后組和15例正常人血清中的五種CTA。(2)采用免疫組化法和Western-blot方法檢測(cè)35例喉鱗癌患者癌中心區(qū)、癌旁0.5cm

8、、癌旁1cm、癌旁2cm和淋巴結(jié)中MAGE-A1、MAGE-A3、NY-ESO-1、SSX-2和SSX-4的表達(dá)情況。 結(jié)果： (1)ELISA法檢測(cè)25例喉鱗患者手術(shù)前、手術(shù)后血清中MAGE-A1、MAGE-A3、NY-ESO-1和SSX-4濃度有顯著性差異(P＜0.05)，SSX-2、CK-13和CK-19手術(shù)前后的濃度均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。在46例喉鱗患者手術(shù)前組、35例喉鱗患者手術(shù)后組和15例正常人中，

9、MAGE-A1、MAGE-A3和CK-13手術(shù)前組和正常人組血清的濃度有顯著性差異(P＜0.05)。NY-ESO-1手術(shù)前組、手術(shù)后組和正常人組血清的濃度均有顯著性差異(P＜0.05)。SSX-4的濃度手術(shù)前組、正常人組兩組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，手術(shù)后組、正常人組兩組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。 (2)免疫組化法檢測(cè)七種蛋白在癌中心區(qū)、癌旁0.5cm、癌旁1cm、癌旁2cm中的表達(dá)逐漸下降，其中MAGE-A1、MAGE-A3、

10、NY-ESO-1、SSX-2、SSX-4(P＜0.05)，而CK-13和CK-19癌中心區(qū)＞癌旁0.5cm(P＞0.05)，癌中心區(qū)＞癌旁1cm＞癌旁2cm(P＜0.05)。Western-blot方法檢測(cè)檢測(cè)的結(jié)果與免疫組化法結(jié)果相同。 結(jié)論： (1)MAGE-A1和MAGE-A3有可能成為喉鱗癌診斷和預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)的CTA血清標(biāo)志物，NY-ESO-1有可能成為喉鱗癌診斷和預(yù)測(cè)早期復(fù)發(fā)的CTA血清標(biāo)志物。 (2)MA