葉酸對人宮頸癌細(xì)胞體外抑制的研究.pdf

1、目的：探討葉酸對人宮頸癌Hela細(xì)胞的作用。 方法：體外培養(yǎng)Hela細(xì)胞，用不同濃度葉酸分別處理24～72小時(shí)后，①噻唑藍(lán)(MTT)法檢測細(xì)胞的生長活性②流式細(xì)胞術(shù)檢測葉酸持續(xù)作用于Hela細(xì)胞48h后細(xì)胞的凋亡率；③RT-PCR技術(shù)檢測Hela細(xì)胞C-myc、P16及P53基因mRNA的表達(dá)水平；④免疫印跡(Western blotting)技術(shù)檢測C-myc、P16及P53蛋白的表達(dá)情況。 結(jié)果：①干預(yù)24h后，75

2、0、1875 nmol/L葉酸組對Hela細(xì)胞抑制率顯著升高(P<0.05)：而干預(yù)48h和72h后，375、750、1875 nmol/L葉酸組，其對Hela細(xì)胞的抑制率顯著高于陰性對照組(P<0.05)，但仍低于順鉑組(P<0.05)，同時(shí)隨干預(yù)時(shí)間的延長和劑量的增加，Hela細(xì)胞的抑制率呈上升趨勢；②葉酸干預(yù)人宮頸癌Hela細(xì)胞48小時(shí)后，流式細(xì)胞儀檢測表明，Hela細(xì)胞出現(xiàn)明顯的凋亡現(xiàn)象，且細(xì)胞凋亡率隨葉酸濃度的增加而明顯上升，

3、存在劑量效應(yīng)關(guān)系；③RT-PCR檢測顯示，P16基因mRNA的表達(dá)水平在18 nmol/L葉酸組與對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，C-myc和P53基因mRNA的表達(dá)水平各葉酸組與對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；④Western blotting檢測提示，各葉酸干預(yù)組與對照組比較C-myc、P16及P53蛋白的表達(dá)均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，且有劑量效應(yīng)關(guān)系。 結(jié)論： ①葉酸在體外對Hela細(xì)胞生長