MRSA中MecA基因表達及PBP2a含量對β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥水平影.pdf

1、目的:探討MRSA中MecA基因表達水平、PBP2a蛋白質(zhì)水平對β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的機制與作用,從分子生物學(xué)水平研究MRSA的耐藥機理。
　　 方法:利用頭孢西丁紙片法篩選MRSA,提取MRSA細菌RNA,逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,Real-Time實時熒光PCR檢測MecA基因的表達水平,單克隆乳膠凝集稀釋法檢測PBP2a效價,瓊脂稀釋法檢測MRSA對頭孢西丁、苯唑西林、頭孢唑啉、阿米卡星、左旋氧氟沙星、阿奇霉素、復(fù)方新諾明、多西

2、環(huán)素、萬古霉素、利奈唑胺的最低抑菌濃度。
　　 結(jié)果:
　　 1.根據(jù)MRSA對頭孢西丁的耐藥水平,40株MRSA分為低水平耐藥組(12株)、中水平耐藥組(15株)、高水平耐藥組(13株)。
　　 2.相對內(nèi)參基因水平,MecA基因的表達水平在MRSA低水平耐藥組、中水平耐藥組、高水平耐藥組分別為:58.87±30.30、363.37±200.05、1257.72±446.63,三組PBPB2a的效價分別為1:1

3、、1:2～1:4、1:4～1:16。
　　 3.PBP2a在同一效價水平,MRSA的MecA基因的表達水平差異較大,對頭孢西丁的耐藥水平相差2～3個稀釋度。
　　 4.MRSA對頭孢西丁、苯唑西林、頭孢唑林的耐藥率為100.0％,對阿米卡星、左旋氧氟沙星、阿奇霉素、復(fù)方新諾明、多西環(huán)素的耐藥率分別為45.0％、62.5％、65.0％、37.5％、30.0％,沒有檢測到對萬古霉素、利奈唑胺耐藥的MRSA,但40株MRSA萬