藥膳飲食對(duì)嚴(yán)重燙傷大鼠免疫功能紊亂調(diào)理的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 1．觀察嚴(yán)重燙傷大鼠傷后免疫功能的改變； 2．觀察藥膳飲食對(duì)嚴(yán)重燙傷大鼠免疫功能紊亂的調(diào)理作用； 3．研討嚴(yán)重燙傷大鼠免疫功能紊亂調(diào)理的可能機(jī)制及改善燒傷后機(jī)體免疫 功能紊亂的有效方法。 方法： 設(shè)計(jì)一種藥膳飲食，按照藥膳飲食的制作方法熬制成湯劑，過濾食物殘?jiān)?℃保存?zhèn)溆?。健康Wistar大鼠100只，體重(200±20)g，雌雄各半，隨機(jī)分成燒傷藥膳喂養(yǎng)組(A組，n=30)、燒傷

2、肉湯喂養(yǎng)組(B組，n=30)、燒傷常規(guī)喂養(yǎng)組(C組，n=30)和正常對(duì)照組(D組，n=10)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物適應(yīng)性喂養(yǎng)一周，8％硫化鈉溶液背部脫毛。實(shí)驗(yàn)前禁食禁飲12h，腹腔注射5％鹽酸氯氨酮(2ml／kg)麻醉。麻醉滿意后，俯臥位，按公式S=K·W<'2/3>(K=0.091，S=體表面積cm<'2>，W=體重g)計(jì)算出30％TBSA面積，調(diào)節(jié)燙傷儀噴頭，106℃，3MPa，蒸汽燙傷8s造成大鼠背部30％TBSAⅢ°燙傷，經(jīng)病理切片證實(shí)，D

3、組為37℃假傷。燙傷大鼠均按Parkland公式于傷后立即腹腔注射乳酸林格氏液復(fù)蘇，麻醉清醒后自由進(jìn)食。A組傷后2h開始以復(fù)溫至37℃的藥膳飲食灌胃，2ml／次，2次／d；B組相同時(shí)相點(diǎn)以2ml肉湯灌胃，C組傷后常規(guī)飼養(yǎng)。A、B、C組大鼠創(chuàng)面均涂碘伏，2次／d；D組于實(shí)驗(yàn)開始后立即活殺取材。A、B、C組于傷后3、7、10 d各取10只，無菌條件下取材：(1)活體采取下腔靜脈血6ml，3ml用EDTA抗凝管裝后送流式細(xì)胞儀室檢測(cè)T淋巴細(xì)胞

4、亞群和NK細(xì)胞活性；另3ml用EDTA抗凝管裝好后送免疫室檢測(cè)血漿IgA、IgG、IgM、C<,3>、C<,4>；(2)抽血后處死大鼠剪取空回腸10cm，縱形剖開，D-hanks液和PBS液洗去腸內(nèi)容物，刮取回腸黏液裝入EP管中，PBS液沖洗3-4次，室溫下過夜后按上述方法再洗滌一次，3，000 r／min離心10min，取上清液-20℃保存，采用雙抗體-PEG放射免疫法測(cè)定腸道slgA。利用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)

5、學(xué)處理。 結(jié)果： 1. 外周血T淋巴細(xì)胞亞群：(1)與D組比較，A、B、C組各時(shí)相點(diǎn)CD3十、CD4+T淋巴細(xì)胞明顯降低，CD4+T／CD8+比值明顯下降，CD8+T細(xì)胞明顯增高(P<0.05或P<0.01)。至傷后14d，A組各指標(biāo)有較大恢復(fù)，但與D組比較仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；(2)A組與B、C組比較，傷后7、14dA組CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞、CD4<'+>／CD8<'+>比例明顯升高，CD8<'+>

6、T淋巴細(xì)胞明顯降低(p<0.05或P<0.01)。 2. NK細(xì)胞活性：(1)與D組比較，A、B、C組NK細(xì)胞活性明顯下降(P<0.05或P<0.01)；(2)A組與B、C組比較，傷后3d至14dNK細(xì)胞活性明顯升高(P<0.05或P<0.01)；(3)A組至傷后14dNK細(xì)胞活性明顯恢復(fù)，與D組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 3. 血漿IgA、IgM、IgG、C3、C4變化：(1)與D組比較，傷后3、7d，A、

7、B、C組IeA、IgM、IgG、C<,3>、C<,4>水平均明顯低于D組(P<0.05或P< 0.01)；傷后14dA、B、C組IgA、IgM、IgG水平均已基本恢復(fù)正常，但C3、C4仍明顯低于D組(P<0.05)；(2)A組與B、C組比較，各時(shí)相點(diǎn)A組IeA、IgM、IgG、C3、C4均高于B、C兩組(P<0.05或P<0.01)。 4. slea的變化：(1)與D組比較，A組傷后3d，slgA明顯低于D組(P<0.05)，

8、傷后7、14d，與D組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；B、C組各時(shí)間點(diǎn)sXea的濃度明顯低于D組(P<0.05或P<0.01)；(2)A組與B、C組比較，A組傷后各時(shí)相點(diǎn)均明顯高于B、C組(p<0.05或P<0.01)。 結(jié)論： 1. 嚴(yán)重燙傷大鼠細(xì)胞免疫和體液免疫功能發(fā)生了改變，T淋巴細(xì)胞亞群比例發(fā)生改變，NK細(xì)胞活性下降，lea、IgM、IgG、C<,3>、C<,4>均表現(xiàn)為不同程度的降低，slgA分泌水平下降。