小鼠胚胎干細胞定向分化為造血細胞的實驗研究.pdf

1、胚胎干細胞(embryonic stem cells,ES cells)所具有的發(fā)育全能性已通過其與胚胎發(fā)育階段的任何組織嵌合的事實所證實.這一特性已廣泛用于轉基因研究,也為科研工作者對特定發(fā)育階段干細胞的研究及治療應用提供了有力工具.ES細胞生成血細胞的能力最初為Doetschman等關注.他們將ES細胞通過懸浮培養(yǎng)誘導分化并注意到具有多層囊狀結構胚胎體的形成,其中許多胚體發(fā)育為含血紅蛋白的血島.科研工作者在研究中發(fā)現(xiàn)ES細胞誘導向造

2、血細胞分化過程中存在三個問題,第一,ES細胞誘導分化為造血細胞的分化效率低;第二,ES細胞向造血細胞分化過程中存在過度分化現(xiàn)象;第三,由于存在發(fā)育屏障,ES來源造血細胞難于植入成年受體重建造血.造血微環(huán)境在胚胎造血發(fā)育的啟動及造血干細胞的發(fā)育完善過程中發(fā)揮了重要的調控作用.因此,科研工作者嘗試在體外模擬胚胎造血發(fā)育微環(huán)境以有效支持ES細胞向造血干細胞發(fā)育,但目前尚未建立公認有效的、特異性支持造血發(fā)育的體外培養(yǎng)體系.本研究將嘗試使用卵黃囊

3、(yolk sac,YS)、胎肝(fetal liver,FL)和骨髓(bone marrow,BM)來源的基質細胞條件培養(yǎng)液在體外模擬不同發(fā)育階段的造血微環(huán)境,比較應用三種來源基質細胞條件培養(yǎng)液及順序誘導方法生成ES來源造血細胞的造血重建功能.用卵黃囊基質細胞條件培養(yǎng)液啟動ES細胞的造血發(fā)育,并采用順序誘導的方法,使ES細胞在體外的造血發(fā)育過程經(jīng)歷類似于體內造血位點的遷移過程,促進ES來源的造血細胞逐步發(fā)育完善,從而獲得在成年受體體內