骨髓間充質干細胞誘導分化為胰島素樣細胞.pdf

1、分類號密級石河子大學碩士學位論文骨髓間充質干細胞誘導分化為胰島素樣細胞研究生裴學蓮指導教師慕曉玲教授申請學位門類級別醫(yī)學碩士學科、專業(yè)名稱人體解剖與組織胚胎學研究方向干細胞研究所在學院醫(yī)學院中國新疆石河子2006年5月骨髓問充質干細胞誘導分化為胰島素樣細胞骨髓間充質干細胞誘導分化為胰島素樣細胞姓名：裴學蓮(人體解剖與組織胚胎學)導師：慕曉玲教授摘要目的：將骨髓間充質干細胞(mesenchymalstemcells，MSCs)誘導分化為胰

2、島素樣細胞，觀察誘導前后細胞的形態(tài)變化及功能。方法：取自然流產胎兒股骨、脛骨等長骨骨髓或成人手術棄骨骨髓，采用全骨髓貼壁培養(yǎng)法，按1X106／ml的密度接種于含10％胎牛血清(FBS)的aMEM培養(yǎng)基中，5％C02培養(yǎng)箱中孵育48h后換液，以后每3天換液一次，細胞貼壁生長呈梭形。l：2傳代繼續(xù)擴增培養(yǎng)，然后分成4組，其中三組細胞為加入不同誘導組合的實驗組，一組為對照組：第一實驗組的細胞首先給予bFGFEGF誘導，然厲用Becutalli

3、n，Activin，HGF等進行誘導：第二實驗組是在第一實驗組的誘導條件基礎上加入2巰基乙醇；第三實驗組基礎誘導條件同第一實驗組，但是在誘導的第二階段加入噻唑烷二酮繼續(xù)培養(yǎng)；第四組設為空白對照。觀察誘導前后細胞形態(tài)，胰島素蛋白表達，細胞表面標志和胰島素分泌量的變化。結果：骨髓間充質干細胞為貼壁生長的梭形細胞，表面抗原CD44表達陽性，CD34陰性。誘導分化斤的各實驗組的細胞形態(tài)變化相似，細胞逐漸變圓，雙硫腙染色可見棕紅色細胞；細胞表面抗