骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島素樣細(xì)胞.pdf

1、分類號密級石河子大學(xué)碩士學(xué)位論文骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島素樣細(xì)胞研究生裴學(xué)蓮指導(dǎo)教師慕曉玲教授申請學(xué)位門類級別醫(yī)學(xué)碩士學(xué)科、專業(yè)名稱人體解剖與組織胚胎學(xué)研究方向干細(xì)胞研究所在學(xué)院醫(yī)學(xué)院中國新疆石河子2006年5月骨髓問充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島素樣細(xì)胞骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島素樣細(xì)胞姓名：裴學(xué)蓮(人體解剖與組織胚胎學(xué))導(dǎo)師：慕曉玲教授摘要目的：將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymalstemcells，MSCs)誘導(dǎo)分化為胰

2、島素樣細(xì)胞，觀察誘導(dǎo)前后細(xì)胞的形態(tài)變化及功能。方法：取自然流產(chǎn)胎兒股骨、脛骨等長骨骨髓或成人手術(shù)棄骨骨髓，采用全骨髓貼壁培養(yǎng)法，按1X106／ml的密度接種于含10％胎牛血清(FBS)的aMEM培養(yǎng)基中，5％C02培養(yǎng)箱中孵育48h后換液，以后每3天換液一次，細(xì)胞貼壁生長呈梭形。l：2傳代繼續(xù)擴(kuò)增培養(yǎng)，然后分成4組，其中三組細(xì)胞為加入不同誘導(dǎo)組合的實(shí)驗(yàn)組，一組為對照組：第一實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞首先給予bFGFEGF誘導(dǎo)，然厲用Becutalli

3、n，Activin，HGF等進(jìn)行誘導(dǎo)：第二實(shí)驗(yàn)組是在第一實(shí)驗(yàn)組的誘導(dǎo)條件基礎(chǔ)上加入2巰基乙醇；第三實(shí)驗(yàn)組基礎(chǔ)誘導(dǎo)條件同第一實(shí)驗(yàn)組，但是在誘導(dǎo)的第二階段加入噻唑烷二酮繼續(xù)培養(yǎng)；第四組設(shè)為空白對照。觀察誘導(dǎo)前后細(xì)胞形態(tài)，胰島素蛋白表達(dá)，細(xì)胞表面標(biāo)志和胰島素分泌量的變化。結(jié)果：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞為貼壁生長的梭形細(xì)胞，表面抗原CD44表達(dá)陽性，CD34陰性。誘導(dǎo)分化斤的各實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞形態(tài)變化相似，細(xì)胞逐漸變圓，雙硫腙染色可見棕紅色細(xì)胞；細(xì)胞表面抗