糖尿病腎病AGEs-RAGE系統(tǒng)的表達(dá)及其干預(yù)措施的實驗研究.pdf

1、第一部分糖尿病腎病及血液透析病人臨床有關(guān)資料 目的：探討低分子糖化終末產(chǎn)物(LMW-AGEs)在不同程度的糖尿病腎病患者體內(nèi)的蓄積情況并觀察金芪降糖片配伍胰激態(tài)酶原對Ⅲ期糖尿病腎病的治療作用。 方法：測定非糖尿病人(N)、無腎病的糖尿病人(DM)和不同階段糖尿病腎病患者(微量白蛋白尿期DN1、臨床蛋白尿期DN2、氮質(zhì)血癥期DN3、尿毒癥期U)的血清中LMW-AGEs熒光強(qiáng)度。觀察了80例Ⅲ期糖尿病腎病患者，其中42例(A

2、組)應(yīng)用金芪降糖片配伍胰激態(tài)酶原治療，38例(B組)單純服用胰激態(tài)酶原，觀察各組用藥12周前后糖化血紅蛋白A1C(HbA1C)、24小時尿微量白蛋白(UMA)、血清晚期糖化終末產(chǎn)物(advancedglycationendproducts，AGEs)的變化。 結(jié)果：1.血清LMW-AGEs熒光強(qiáng)度：N組＜DM組，DN1組＜DN2組，DN3組＜U組，DM與DN1以及DN2與DN3之間差別無顯著性；2.用藥12周后，A組上述指標(biāo)均明

3、顯下降，B組HbA1C和UMA有明顯下降，其余指標(biāo)較治療前無明顯變化。A、B兩組患者治療后比較，A組患者的Homa-IR、UMA、血清AGEs水平均低于B組患者，差異有顯著性，而兩組患者的HbA1C水平?jīng)]有顯著性差異。 結(jié)論：測定血清LMW-AGEs的水平可以對早期腎損害的診斷、腎損害程度的分析以及終末期腎病的評價提供幫助。金芪降糖片配伍胰激態(tài)酶原對早期糖尿病腎病有較好的治療作用。 第二部分糖尿病大鼠腎皮質(zhì)AGEs-RA

4、GE系統(tǒng)的表達(dá)及其抑制措施的實驗研究 目的：觀察糖尿病大鼠腎皮質(zhì)中AGEs、RAGE、NF-KB、TGF-β1、VEGF和CTGF等轉(zhuǎn)錄因子和細(xì)胞因子的表達(dá)及腎組織形態(tài)學(xué)變化，了解金芪降糖片是否有腎臟保護(hù)作用，并對其機(jī)制進(jìn)行初步探討。 方法：采用RT-PCR、westernblotting等技術(shù)觀察不同時期(造模后4、12、20周)糖尿病組(DM組)、糖尿病給藥組(DD組)和對照組(N組)大鼠腎皮質(zhì)AGEs、RAGE、N

5、F-KB、TGF-β1、VEGF和CTGF水平，同時觀察各組大鼠腎臟形態(tài)學(xué)改變，評價金芪降糖片的腎保護(hù)作用。 結(jié)果：1.血糖：DM組(23.47±4.12mmol/l)、DD組(23.31±4.13mol/l)明顯高于N組(p＜0.001)，DM組和DD組之間無顯著性差別(p＞0.05)。2.AGEs：實驗4周，DD、DM、N組腎臟AGEs水平無顯著性差異(p＞0.05)；實驗12周和20周，DM組AGEs水平高于N組(p＜0.

6、05)，差別有統(tǒng)計學(xué)意義，但DM組和DD組之間、DD組和N組之間AGEs水平無顯著性差異(p＞0.05)。3.RAGE：實驗第4周，DM組RAGE-mRNA水平高于N組(p＜0.05)，但DM組和DD組之間、DD組和N組之間無顯著性差異(p＞0.05)；實驗第12周和20周,DM組RAGE-mRNA水平高于N組(p＜0.01)和DD組(p＜0.05),DD組和N組之間無顯著性差異(p＞0.05)。RAGE蛋白表達(dá)水平與RAGE-mRNA

7、一致。4.NF-KB：第4周和第12周，DD、DM、N組NF-κB65表達(dá)水平未發(fā)現(xiàn)顯著性差異(p＞0.05)；實驗第20周，DM組NF-κB65表達(dá)水平高于DD組(p＜0.05)和N組(p＜0.01)，DD組和N組之間無顯著性差別(p＞0.05)。5.VEGF：第四周，各組間VEGF-mRNA和蛋白表達(dá)水平無顯著性差異(p＞0.05)；實驗第12周，DM組VEGF-mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著性高于N組(p＜0.05；p＜0.01)，

8、但DM組和DD組、DD組和N組之間VEGF-mRNA和蛋白表達(dá)水平無顯著性差異(p＞0.05)。實驗第20周，DM組VEGF-mRNA和蛋白表達(dá)水平均顯著性高于N組(p＜0.001)和DD組(p＜0.001)，DD組和N組之間無顯著性差異(p＞0.05)。6.TGF-β1：實驗第4周，DD組TGF-β1-mRNA表達(dá)水平顯著性高于N組(p＜0.05)，但DD組和DM組、DM組和N組之間TGF-β1-mRNA表達(dá)水平無顯著性差異(p＞0.

9、05)，而三組間TGF-β1蛋白表達(dá)水平則未見顯著性差異(p＞0.05)；實驗第12周，DM組TGF-β1-mRNA及蛋白表達(dá)水平顯著性高于N組(p＜0.001；p＜0.01)和DD組(p＜0.001；p＜0.01)，DD組和N組之間TGF-β1-mRNA及蛋白表達(dá)水平無顯著性差異(p＞0.05)；第20周，DM組TGF-β1-mRNA及蛋白表達(dá)水平顯著性高于N組(p＜0.001)和DD組(p＜0.001)，DD組TGF-β1-mRNA

10、表達(dá)水平顯著性高于N組(p＜0.001)但蛋白表達(dá)水平與N組無顯著性差異(p＞0.05)。7.CTGF：實驗第4周，各組大鼠腎臟CTGFmRNA及蛋白表達(dá)水平無顯著性差異(p＞0.05)；實驗第12周，DM組CTGF-mRNA表達(dá)水平顯著性高于N組(p＜0.001)和DD組(p＜0.05)，但蛋白表達(dá)水平未見顯著性差異(p＞0.05)，DD組和N組之間CTGF-mRNA及蛋白表達(dá)水平無顯著性差異(p＞0.05)；實驗第20周，DM組CT

11、GF-mRNA及蛋白表達(dá)水平顯著性高于N組(p＜0.001；p＜0.01)和DD組(p＜0.001；p＜0.01)，DD組和N組之間CTGF-mRNA及蛋白表達(dá)水平無顯著性差異(p＞0.05)。 結(jié)論：1.尾靜脈一次注射STZ可以成功制備大鼠糖尿病模型。2.AGEs、RAGE、NF-κB、VEGF、TGF-β1及CTGF與糖尿病腎病的發(fā)生和發(fā)展有著密切的聯(lián)系。而RAGE→氧化應(yīng)激→p21ras/有絲分裂激動蛋白激酶(P21ras