仿刺參多糖的提取分離及初步結(jié)構(gòu)分析.pdf

1、本文以仿刺參為原料進(jìn)行了仿刺參多糖的提取、分離，并對(duì)仿刺身多糖中的糖胺聚糖進(jìn)行了理化性質(zhì)和結(jié)構(gòu)分析。建立并優(yōu)化了柱前衍生高效毛細(xì)管電泳法測(cè)定海參多糖單糖組成的方法，該方法具有簡(jiǎn)單、快速、分離效率高等特點(diǎn)，能同時(shí)測(cè)定海參多糖中氨基糖、中性糖及糖醛酸的組成，對(duì)于研究海參多糖的單糖組成有重要意義。仿刺參多糖提取采用木瓜蛋白酶水解、乙醇沉淀和醋酸鉀沉淀法；分子量及其分布的測(cè)定采用高效凝膠滲透色譜法；化學(xué)組成及其單糖組成分別采用傳統(tǒng)化學(xué)方法和柱前

2、衍生高效毛細(xì)管電泳法，并對(duì)兩種方法的結(jié)果進(jìn)行了對(duì)比；利用陰離子交換柱層析和凝膠柱層析對(duì)仿刺參多糖不同組分進(jìn)行了分離純化；仿刺參糖胺聚糖硫酸基的取代位置可以通過(guò)紅外色譜法、核磁共振波譜以及質(zhì)譜法測(cè)定；糖胺聚糖的支鏈和主鏈結(jié)構(gòu)可以通過(guò)部分酸水解，凝膠柱層析分離，色譜分析測(cè)定。
　　 本研究表明，通過(guò)溫和的酶水解法的到的仿刺參多糖得率為1.18‰(以鮮海參計(jì)算)。GPC法得到的分子量為5萬(wàn)。仿刺參多糖總糖、蛋白質(zhì)、硫酸基、糖醛酸及氨基

3、糖含量分別為51.54％、5.50％、25.07％、17.20％和13.53％。氣相色譜法測(cè)定其中性糖結(jié)果表明仿刺參多糖主要含有巖藻糖，含量為15.4％。柱前衍生高效毛細(xì)管色譜法采用4 mol/L，TFA，110℃，6h的水解條件，利用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生，于紫外245nm處檢測(cè)，進(jìn)行毛細(xì)管電泳分析。實(shí)驗(yàn)對(duì)10種不同海參多糖進(jìn)行了單糖組成分析，建立了高效毛細(xì)管電泳法測(cè)定海參單糖組成的方法。仿刺參多糖的單糖組成為

4、GalN：Glc：Man：Fuc：Gal：GlcUA=3.23:0.83:0.38:3.97:0.68:1.00，其對(duì)糖醛酸和氨基糖的組成測(cè)定結(jié)果和化學(xué)法測(cè)定結(jié)果基本一致，但對(duì)中性糖的測(cè)定，GC方法測(cè)定結(jié)果偏低。紅外波譜結(jié)果表明，仿刺參多糖中含有羧基、羥基、乙酰氨基、硫酸基和巖藻糖，在848cm-1的吸收峰表明其硫酸基取代位置是巖藻糖的C-4位或者氨基半乳糖的C-4位。仿刺參多糖通過(guò)Q-FF陰離子交換樹(shù)脂洗脫，分別在鹽濃度為0 mol/