仿刺參中多糖活性成分研究.pdf

1、仿刺參(ApostichopusjaponicusSelenka)屬于棘皮動物門(Echinodermata)、海參綱(Holothuroidea)、楯手目(Aspidochiroia)、刺參科(Stichopodidae)、仿刺參屬(Apostichopus)的海洋動物。廣泛生長在我國北方海域,是一種及其著名的營養(yǎng)保健食品,具有重要的經(jīng)濟(jì)價值。
　　 本課題對遼寧省大連海域的仿刺參(A.japonicusSelenka)中的多

2、糖進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)和生物活性研究。采取水提取法進(jìn)行提取,用膜分離技術(shù)和乙醇沉淀法純化,Sevage法去除蛋白,雙氧水脫色制備得仿刺參粗多糖。以仿刺參凍干粉為原料提取仿刺參粗多糖的得率均值為8.55％。應(yīng)用超濾裝置,DEAE-纖維素柱層析,SephadexG-100柱層析,高效凝膠過濾色譜(HPGFC)等多種分離技術(shù)對仿刺參粗多糖進(jìn)行分離純化得到以下均-多糖組分,AJP-1(得率為5.840％)、AJP-2(得率為6.480％)、AJP-

3、3(得率為6.816％)、AJP-4(得率為6.344％)、AJP-5(得率為8.768％)。上述多糖組分經(jīng)紫外掃描不含蛋白質(zhì)和氨基酸,經(jīng)HPGFC檢測均一性較好。
　　 各仿刺參多糖組分樣品為乳白色絮狀粉末,易溶于水和二甲基亞砜,不溶于乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑,硫酸-苯酚反應(yīng)和Molish反應(yīng)均為陽性。AJP-1:相對分子量為101291Da,糖醛酸的含量是樣品中最高的,含量為1.1170％。AJP-2:相對分子量為73010Da

4、,糖醛酸含量為0.4202％。AJP-3:相對分子量為39638Da,糖醛酸含量為0.5046％。AJP-4:相對分子量為9716Da,糖醛酸含量較低,無法檢測出具體的質(zhì)量百分比。AJP-5:相對分子量為2213Da,樣品未檢測出糖醛酸。
　　 所得各個仿刺參多糖組分中糖組成有一定的差異,除AJP-5不含巖藻糖和糖醛酸外,其余都含有巖藻糖、葡萄糖、氨基糖和糖醛酸。組成成分相同的多糖它們的單糖的含量比例也不同,而且糖苷鍵類型也有差

5、異。仿刺參多糖樣品基本上均含有羥基、羧基、乙酰胺基、硫酸酯基以及巖藻糖的甲基,且不同海參多糖硫酸酯基的取代位點(diǎn)略有差異。所得多糖樣品均為α構(gòu)型。除AJP-5外,其余多糖樣品都主要含有C-2,4位的雙硫酸酯基取代,而且大部分都同時含有C-3,4位的雙硫酸酯基取代、C-4位的單硫酸酯基取代以及未被硫酸酯化的巖藻糖。
　　 仿刺參多糖樣品的抗凝血活性實(shí)驗(yàn)顯示,多糖樣品濃度在一定劑量下顯著延長凝血酶時間(TT)。AJP-1的相對分子量大

6、于10萬,抗凝血效果最好;AJP-2與AJP-3相對分子量在3-8萬之間,抗凝效果次之;而AJP-4相對分子量在1萬左右,抗凝效果不明顯。相對分子量大的仿刺參多糖抗凝效果強(qiáng)于相對分子量小的仿刺參多糖,可能與多糖含有的硫酸酯基、糖醛酸、氨基糖、巖藻糖等的含量與取代情況以及糖鏈結(jié)構(gòu)有關(guān);相對分子量1萬以下的仿刺參多糖抗凝效果不佳,這可能是由于多糖硫酸酯基、糖醛酸、巖藻糖含量太低的緣故。
　　 仿刺參多糖的PTPσ抑制試驗(yàn)顯示,對PT