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
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1、目的:為觀察蘆丁對(duì)四氯化碳損傷的體外培養(yǎng)肝細(xì)胞的保護(hù)作用,用四氯化碳建立培養(yǎng)肝細(xì)胞損傷模型,利用生化檢測(cè),組織化學(xué),電鏡形態(tài)學(xué)觀察等方法進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究,探討了蘆丁對(duì)培養(yǎng)肝細(xì)胞的保護(hù)作用
方法:取Wistar大白鼠乳鼠(4--5天齡)肝細(xì)胞原代單層培養(yǎng)至5--6天用于實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)共設(shè)6個(gè)組:正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、藥物對(duì)照組(人參總皂甙)、實(shí)驗(yàn)組(大,中,小劑量,經(jīng)篩選,蘆丁水提物濃度為800ug/ml為最適宜濃度)。采用組織化學(xué)
2、、生化檢測(cè)方法及透射電鏡等方法觀察肝細(xì)胞的病理及超微結(jié)構(gòu)的變化。
結(jié)果:組織化學(xué)觀擦,四氯化碳損傷模型組肝細(xì)胞內(nèi)糖原顆粒明顯減少,染色淺,琥玻酸脫氫酶(SDH)活性明顯降低,胞質(zhì)內(nèi)酶顆粒明顯減少,染色淺,而酸性磷酸酶(ACP)活性明顯增強(qiáng),黑色酶顆粒明顯增多,染色深,而實(shí)驗(yàn)組肝細(xì)胞糖原顆粒明顯增多,染色深,琥玻酸脫氫酶(SDH)活性明顯增強(qiáng),酶顆粒明顯增多,染色深,ACP酶活性明顯降低,酶顆粒明顯減少,染色淺,藥物對(duì)照組的上述
3、反應(yīng)與實(shí)驗(yàn)組基本相同;生化檢測(cè)結(jié)果與損傷組相比較,其他各組的SOD活性及過(guò)氧化物脂質(zhì)產(chǎn)物(MDA)含量以及GoT含量呈現(xiàn)顯著性差異。電鏡觀察;損傷組肝細(xì)胞質(zhì)內(nèi),線粒體腫脹,嵴斷裂,雙層膜結(jié)構(gòu)不清,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒,滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)灶型增生成囊泡狀,高爾基復(fù)合體囊腔塌陷,變細(xì),溶酶體增多,糖元顆粒明顯減少,微絨毛出現(xiàn)腫脹。但是,實(shí)驗(yàn)組肝細(xì)胞及藥物對(duì)照組的肝細(xì)胞內(nèi)上述變化均得到明顯恢復(fù).
結(jié)論:蘆丁水提物對(duì)四氯化碳損傷的體外培養(yǎng)肝細(xì)胞具
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