高糖和血管緊張素Ⅱ通過TLR4途徑協(xié)同刺激大鼠腎小球系膜細胞炎癥因子的表達及干預研究.pdf

1、目的:探討高糖和血管緊張素Ⅱ是否可以協(xié)同刺激TLR4的表達及信號通路的激活，觀察厄貝沙坦是否下調(diào)TLR4的表達，以及血管緊張素Ⅱ是否為TLR4的配體及AT1R與TLR4之間的可能協(xié)同關(guān)系。
　　方法:研究對象為大鼠腎小球系膜細胞(HBZY-1)。細胞同步化后分組:正常對照組(5.6 mM D-glucose)、高糖組(25 mM D-glucose)、血管緊張素Ⅱ(10-7M)組、高糖+血管緊張素Ⅱ組、AngⅡ(10-7 M)+厄

2、貝沙坦(10-5 M)組、AngⅡ+厄貝沙坦(10-5 M)+TLR4阻斷劑(10 ug/ml)組。采用real-time PCR，westernblot檢測TLR4，MyD88mRNA及蛋白的表達變化，分別收集細胞上清液用ELISA檢測IL-6、MCP-1蛋白的表達。
　　結(jié)果:高糖和血管緊張素Ⅱ分別刺激腎小球系膜細胞12小時后TLR4、MyD88mRNA表達明顯增加，刺激24小時細胞上清液IL-6、MCP-1的表達亦顯著增加，

3、與正常對照組相比差異顯著（P＜0.01）。高糖和血管緊張素Ⅱ共同刺激HBZY-1細胞，下游因子MyD88mRNA及蛋白，炎癥因子IL-6，MCP-1表達進一步增加，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。厄貝沙坦可以部分阻斷由AngⅡ刺激的TLR4信號通路的激活，厄貝沙坦協(xié)同TLR4阻斷劑干預HBZY-1可以進一步下調(diào)MyD88及其下游因子的表達。
　　結(jié)論:
　　1、高糖和AngⅡ可以通過TLR4/MyD88信號通路誘導炎癥因子