新型三嗪類抗球蟲藥沙咪珠利的生殖毒性與致畸毒性的研究.pdf

1、本文進(jìn)行了沙咪珠利的生殖毒性與致畸毒性研究，以期獲得沙咪珠利繁殖毒性相關(guān)的安全評價資料，具體內(nèi)容包括以下幾個方面：
　　1.飼料中沙咪珠利的含量檢測
　　建立HPLC-UV法測定飼料中的沙咪珠利含量，以4-硝基鄰甲酚為內(nèi)標(biāo)物，C18柱為分析柱，乙腈-0.2％磷酸水溶液為流動相。飼料樣品先后經(jīng)乙腈提取，正己烷除脂，紫外檢測（波長251nm）和內(nèi)標(biāo)法定量。方法學(xué)考察結(jié)果表明，該方法特異性、精密度、準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性良好，在1～50

2、mg/kg添加范圍具有良好的線性關(guān)系，為沙咪珠利在飼料中的準(zhǔn)確測定提供了可行的方法。
　　2.生殖毒性試驗
　　健康非生產(chǎn)的SPF級SD大鼠240只，雌雄各半，分為4組，每組雌雄各30只，設(shè)空白對照組和沙咪珠利試驗組（2、8、30 mg/kg飼料），喂養(yǎng)染毒進(jìn)行“兩代一胎”繁殖實驗。對試驗中大鼠體重、飼料攝入量、繁殖指數(shù)等各項數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，并對大鼠的生殖器官進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。結(jié)果顯示，給藥組與空白組大鼠的體重與飼料利用

3、率成正相關(guān)，且變化趨勢一致；大鼠的生殖器官沒有產(chǎn)生與與藥物相關(guān)的病理性變化。給藥組的各項繁殖指標(biāo)基本與空白組沒有明顯差異，但有個別的指標(biāo)如出生存活率，在F1代中略偏低。30 mg/kg劑量組仔鼠的體重明顯偏輕，顯示藥物可能通過母乳影響仔鼠發(fā)育。
　　3.喂養(yǎng)致畸試驗
　　喂養(yǎng)致畸試驗與繁殖試驗進(jìn)行聯(lián)合,設(shè)定空白對照組和沙咪珠利試驗組（2、8、30 mg/kg飼料），將大鼠按體重隨機(jī)分為4組，每組雌雄各30只。在繁殖試驗的F2

4、a哺乳結(jié)束后，讓F1代大鼠繼續(xù)交配，在妊娠第20天時進(jìn)行剖腹檢查，對F2b代進(jìn)行致畸觀察。試驗結(jié)果顯示沙咪珠利30 mg/kg飼料添加組胎鼠的平均仔重明顯低于空白對照組，但其他指標(biāo)與空白對照組均無顯著差異。各組均未出現(xiàn)與藥物相關(guān)的骨骼和內(nèi)臟畸形，顯示藥物對胎兒發(fā)育沒有明顯影響。
　　4.大鼠血漿中的藥物濃度測定
　　建立了UPLC-MS檢測法，測定大鼠血漿中沙咪珠利的濃度。樣品用乙腈提取，經(jīng)BEH C18柱分離，以乙腈-0.

5、1%甲酸水溶液為流動相。待測物通過電噴霧離子源的負(fù)離子模式下的選擇離子監(jiān)測方式進(jìn)行檢測，內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量，內(nèi)標(biāo)物為4-硝基鄰甲酚。方法學(xué)考察結(jié)果顯示，該方法特異性、準(zhǔn)確度、精密度及穩(wěn)定性等都符合要求。在沙咪珠利的30天亞慢毒性試驗的第0、1、2、3、28、29、30天及恢復(fù)期的第7天采集樣品；兩代繁殖毒性的實驗中，在每一代的實驗結(jié)束時采集母鼠和剛斷奶仔鼠的血漿，在繁殖毒性試驗結(jié)束的恢復(fù)期進(jìn)行采集樣品，然后檢測血漿中藥物濃度。結(jié)果顯示，在長