槲皮素對大鼠心臟成纖維細(xì)胞纖維連接蛋白和轉(zhuǎn)化生長因子β-,1-表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究槲皮素(Que)對培養(yǎng)的乳鼠心臟成纖維細(xì)胞的纖維連接蛋白(FN)和轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)表達(dá)的影響，探討其在心肌肥厚中可能的作用機(jī)制。 方法：1．細(xì)胞分離培養(yǎng)和鑒定：用胰酶消化法分離細(xì)胞，差速貼壁分離法獲得心肌成纖維細(xì)胞，光鏡和免疫組化的方法鑒定細(xì)胞。2．細(xì)胞增殖檢測：WST法測定細(xì)胞增殖，免疫組化方法測定心肌成纖維細(xì)胞FN及TGF-β1的表達(dá)。3．實(shí)驗(yàn)分組：根據(jù)不同的藥物及藥物不同濃度，實(shí)驗(yàn)共分二大部分，第

2、一部分：觀察Que對心肌成纖維細(xì)胞的影響，主要分兩個(gè)步驟：首先觀察Que對基礎(chǔ)狀態(tài)下心肌成纖維細(xì)胞增殖是否有影響，設(shè)不同濃度的Que(10-6-10-4M)組和空白對照組。第二步觀察Que對血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)刺激下心肌成纖維細(xì)胞增殖的影響，設(shè)空白對照組、AngⅡ組和不同濃度的Que(10-6-10-4M)+Ang Ⅱ組。以WST法檢測心肌成纖維細(xì)胞增殖情況。第二部分，觀察Que對FN和TGF-β1表達(dá)的影響，主要分兩個(gè)步驟：首先觀

3、察Que對基礎(chǔ)狀態(tài)下心肌成纖維細(xì)胞FN、TGF-β1表達(dá)的影響，設(shè)不同濃度的Que(10-6-10-4M)組和空白對照組。第二步觀察Que對Ang Ⅱ刺激下FN、TGF-β1表達(dá)的影響，設(shè)空白對照組、Ang Ⅱ組和不同濃度的Que(10-6-10-4M)+Ang Ⅱ組。以免疫組化方法測定心肌成纖維細(xì)胞FN和TGF-β1的表達(dá)。 結(jié)果：1．培養(yǎng)的細(xì)胞經(jīng)過光鏡和免疫組化的方法鑒定證實(shí)為心肌成纖維細(xì)胞。2．Que對心肌成纖維細(xì)胞增殖和

4、FN、TGF-β1表達(dá)的影響：①Q(mào)ue對基礎(chǔ)狀態(tài)下的成纖維細(xì)胞增殖無明顯影響，Que各濃度組(10-6-10-4M)與空白對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。②Que呈濃度依賴性的抑制AngⅡ的促增殖作用。Que各濃度組OD值明顯低于AngⅡ組(P<0.01)。③Que在基礎(chǔ)狀態(tài)下能抑制FN、TGF-β1的表達(dá)，Que各濃度組(10-6-10-4M)FN、TGF-β1均低于空白對照組(P<0.01)。④Que呈濃度依賴性的抑制A