維生素C對重癥急性胰腺炎模型大鼠腸粘膜保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：①探討重癥急性胰腺炎(SAP)腸粘膜損傷機(jī)制；②觀察大劑量維生素C(VitC)對重癥急性胰腺炎腸粘膜是否有保護(hù)作用及其作用機(jī)理。 方法：選取體重相當(dāng)雄性SD大鼠120只，隨機(jī)分為3組：SAP模型組(n=40)：經(jīng)胰膽管注射5％?；悄懰徕c(0.1ml/100g)制備SAP模型，制作后不經(jīng)過任何治療；維生素C干預(yù)組(Il=40)：模型制作成功后即刻經(jīng)陰莖背靜脈注入大劑量維生素C(30mg/100g)；正常對照組(n=40)：開

2、腹后僅翻動胰腺，不制作SAP模型，術(shù)后即刻經(jīng)陰莖背靜脈注入等量生理鹽水。術(shù)后3、6、12、24小時分批處死各組動物，進(jìn)行如下檢測：(1)門靜脈抽血測定淀粉酶、內(nèi)毒素；(2)細(xì)菌易位量測定：取腹水及腸系膜淋巴結(jié)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，采用稀釋倍比法測定細(xì)菌易位量；(3)丙二醛(Malon-dialdehvde，MDA)測定：取同位置回腸組織，用硫代巴比妥酸比色法測定MDA：(4)病理檢查：取大鼠同位置胰腺及回腸組織進(jìn)行HE染色，觀察胰腺及腸粘膜損傷

3、情況，并分別按標(biāo)準(zhǔn)評分。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，應(yīng)用t檢驗(yàn)。 結(jié)果：(1)血淀粉酶測定：各時間點(diǎn)淀粉酶分別為(U/L)：SAP組3578.20±1251.36、5008.45±2015.48、8574.20±3570.65、11246.50±5120.85，維生素C干預(yù)組1461.30±485.22、1 879 36±750.26、2456.85±1271.25、4879.56±2431.30。SAP組和維生素C干預(yù)組各時間點(diǎn)淀粉酶均明顯高

4、于對照組，維生素C干預(yù)組各時間點(diǎn)淀粉酶均明顯低于SAP組，兩組比較有顯著差異(P<0.01)。 (2)門靜脈內(nèi)毒素測定：各時間點(diǎn)內(nèi)毒素分別為(EU/L)：SAP組35.80±5.25、95.01±8.13、147.05±7.15、155.44±9.1 3，維生素C干預(yù)組34.75±5.1 3、68.175±7.56、120.36±7.59、131.42±8.85。SAP模型制作后6小時，SAP組及維生素C干預(yù)組血漿內(nèi)毒素開始增

5、高，且隨時間延長內(nèi)毒素逐漸增高，維生素C干預(yù)組6小時后各時間點(diǎn)內(nèi)毒素均明顯低于SAP組，兩組比較有顯著差異(P<0.01)。 (3)細(xì)菌易位量測定：①各時間點(diǎn)腸系膜淋巴結(jié)細(xì)菌易位量分別為(CFU/g)：SAP組O、4575±650、10473±2365、13250±3625，維生素C干預(yù)組0、152±113、1278±278、1648±268。②各時間點(diǎn)腹水細(xì)菌易位量分別為(CFU/g)：SAP組0、1575±650、5934

6、±625、7548±1625，維生素C干預(yù)組0、142±53、678±278、1648±268。模型制備后6小時腸系膜淋巴結(jié)和腹水出現(xiàn)細(xì)菌易位，隨時間延長易位量逐漸增加，維生素C干預(yù)組各時間點(diǎn)細(xì)菌易位量均明顯低于SAP組，兩組比較有顯著差異(P<0.01)。 (4)腸組織MDA測定：各時間點(diǎn)SAP組MDA分別為(umol/g.prot)：SAP組1.25±0.32、1.37±0.36、1.55±0.48、2.65±0.44，維生

7、素C干預(yù)組0.85±0.28、1.02±0.24、1.15±0.35、2.12±0.40。模型制備后3小時SAP組及維生素C干預(yù)組腸組織MDA即明顯高于對照組，且隨時間延長MDA含量逐漸增加，維生素C干預(yù)組各時間點(diǎn)MDA均低于SAP組，兩組比較有差異(P<0.05)。 (5)腸粘膜病理評分：各時間點(diǎn)SAP組腸粘膜病理評分分別為：0、1.36±0.26、1.75±0.42、2.75±0.44，維生素C干預(yù)組0、1.14±0.20、

8、1.26±0.35、1.85±0.40，模型制備后6小時腸粘膜出現(xiàn)病理損害，隨時間延長病損逐漸加重。SAP組腸粘膜絨毛上皮剝脫、間質(zhì)水腫，固有層充血水腫，部分腸粘膜上皮細(xì)胞變性、壞死、脫落，維生素C干預(yù)組各時間點(diǎn)腸粘膜病損較SAP組減輕，兩組比較有差異(P<0.05)。 (6)胰腺病理評分：各時間點(diǎn)SAP組胰腺病理評分分別為：SAP組7.35±0.86、10.46±0.95、12.75±1.42、15.72±1.44，維生素C干

9、預(yù)組6.36±0.76、 8.14±1.05、9.26±1.35、12.65±1.40。SAP組胰腺組織充血水腫、部分出血、大片壞死，中性粒細(xì)胞浸潤嚴(yán)重，維生素C干預(yù)組各時間點(diǎn)胰腺病損較SAP組減輕，兩組比較有差異(P<0.05)。 結(jié)論：①SAP模型大鼠腸粘膜屏障作用破壞，腸道細(xì)菌易位至腹水及腸系膜淋巴結(jié)，血中內(nèi)毒素明顯增加。②腸粘膜損傷機(jī)制：SAP時，自由基過量產(chǎn)生，導(dǎo)致腸粘膜細(xì)胞發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，引起腸粘膜損傷。③大劑