AsiaⅠ型口蹄疫雙效表達(dá)載體構(gòu)建及表達(dá).pdf

1、口蹄疫(Foot-and-mouth disease，F(xiàn)MD)是由口蹄疫病毒引起的一種烈性傳染病，嚴(yán)重危害畜牧業(yè)生產(chǎn)，對(duì)流行國(guó)家造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前，接種疫苗仍是防治該病的重要手段之一，現(xiàn)有的疫苗接種動(dòng)物后，雖能誘導(dǎo)免疫動(dòng)物產(chǎn)生體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)，但其在免疫目標(biāo)動(dòng)物后，都會(huì)有一段時(shí)間的有效抗體產(chǎn)生期，即免疫空白期。動(dòng)物在這一時(shí)期若遇到病原微生物的入侵往往會(huì)造成疫病流行。為了解決這一問(wèn)題，本研究以Asia I/JQ株為模板，進(jìn)行了雙

2、效疫苗的探索研究，獲得了以下結(jié)果： 1.用RT-PCR得到針對(duì)FMDV基因組5’非編碼區(qū)的AS片段、P1+2A結(jié)構(gòu)蛋白基因和3C非結(jié)構(gòu)蛋白基因，將P1+2A、3C和AS依次克隆至T載體，測(cè)序結(jié)果表明，已得到正確的目的基因片段。 2.將目的基因AS、P1+2A+3C依次亞克隆到逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體pQCXIX的多克隆位點(diǎn)Ⅰ和Ⅱ中，經(jīng)酶切、PCR鑒定及測(cè)序分析，表明成功構(gòu)建了FMDV雙效表達(dá)載體pQC-AS-P1+2A+3C。