中藥微乳給藥體系丹參酮和丹酚酸復(fù)合微乳給藥體系的研究.pdf

1、丹參作為活血化淤藥，已廣泛應(yīng)用于心腦血管疾病的治療。丹參具有活血化淤活性的有效部位主要為水溶性丹酚酸類和脂溶性丹參酮類。兩類活性成份均表現(xiàn)出抗血小板聚集作用、抗血栓作用、抗氧化損傷作用、抗動脈粥樣硬化、縮小心肌梗死面積、降低心肌耗氧量以及防治心肌缺血再灌注損傷等作用。新的研究表明在缺氧損傷條件下，水溶性成份丹酚酸B與脂溶性成份丹參酮ⅡA不同的配比均可提高心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞的活力，降低LDH水平，降低NO的釋放和ET的分泌，而且效果優(yōu)于二

2、者單獨給藥。然而，丹參酮類物質(zhì)具有菲醌類片狀剛性結(jié)構(gòu)，在水中幾乎不溶，生物利用度低，限制了其臨床療效。微乳作為藥物載體具有可以增大藥物溶解度、促進藥物吸收、提高藥物生物利用度等優(yōu)點，特別是作為油/水分散體系，油相和水相可以載有不同理化性質(zhì)特別是不同溶解性的藥物，從而可以發(fā)揮藥物間的協(xié)同作用。為了提高丹參酮的生物利用度，發(fā)揮丹參酮和丹酚酸的協(xié)同作用，以及為制備中藥復(fù)方微乳提供借鑒，本文通過相圖法和正交設(shè)計法研究了多相載藥對微乳的影響，制備

3、了油相和水相分別載有丹參酮和丹酚酸的丹參復(fù)合微乳(Co-ME)，并作了相應(yīng)的動物在體腸吸收研究和藥效學(xué)比較。 1、微乳相圖的基礎(chǔ)研究以及微乳形成影響因素的考察 離子型表面活性劑通常刺激性較大不適合制備微乳，一般選用非離子型表面活性劑為佳，小分子量的醇類適合作為助表面活性劑。本實驗采用SolutrolHS-15為表面活性劑，乙醇為助表面活性劑，利用相圖法考察不同油相、不同Km、不同溫度、不同水相、不同載藥量對微乳形成區(qū)域的

4、影響。相圖結(jié)果表明：1)油相不同，微乳形成區(qū)域明顯不同，其中油酸乙酯為油相時微乳形成區(qū)域較大且微乳較穩(wěn)定；2)Km＞9：1時，凝膠區(qū)顯著，隨著Km的減小，凝膠區(qū)不斷變小，同時微乳所能容載的最大水相量不斷降低；3)溫度較低時，出現(xiàn)明顯的凝膠區(qū)，而在溫度較高時，凝膠區(qū)明顯減小；4)不同水相溶液對微乳區(qū)域影響相對較小，而水相液為Vc溶液和丹參水提物溶液時，均可顯著縮小凝膠形成區(qū)域，擴大微乳形成區(qū)域；5)微乳對水相的最大容載能力受油相載藥量的影

5、響甚微，但隨著水相丹參水提物濃度的升高而明顯下降。 用正交設(shè)計法對微乳粒徑的影響因素進行考察，結(jié)果表明：水相用量對微乳粒徑影響較大，而水相中丹酚酸的濃度、油相的用量對微乳粒徑影響相對較小。采用單因素全面實驗法進一步考察水相用量對微乳粒徑的影響，結(jié)果表明：微乳強度徑隨水相量的增加明顯減小，而體積徑、數(shù)量徑隨水相量的變化不明顯；當(dāng)水相含量高于87.5％時，強度徑變化緩慢，并基本與體積徑、數(shù)量徑保持一致。 用正交設(shè)計法對微乳黏

6、度的影響因素進行考察，結(jié)果表明：水相用量對微乳黏度影響較大，而水相中丹參水提物的濃度、油相的用量對微乳黏度影響相對較小。采用單因素全面實驗法進一步考察水相用量對微乳黏度的影響，結(jié)果表明：水相/油相比例發(fā)生改變時，微乳黏度隨水相含量的增大而減小，當(dāng)水相含量高于83.3％時，黏度變化趨于平緩。采用區(qū)組配伍實驗考察水相濃度、油相含藥量對微乳黏度的影響，結(jié)果表明：微乳的黏度受油相載藥量的影響甚微，受水相丹參水提物濃度的影響相對較大，隨其升高而黏

7、度逐漸增大，但增大幅度較小。 2、丹參酮和丹酚酸復(fù)合微乳的制備及性質(zhì)考察 在上述研究基礎(chǔ)上，制備了丹參酮和丹酚酸復(fù)合微乳，通過大鼠在體腸吸收實驗確定了最終處方配比。用原子力顯微鏡和動態(tài)光散射技術(shù)進行了形態(tài)學(xué)和粒徑分布考察，用反相高效液相色譜法對微乳中丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量進行測定，同時以高速離心實驗和溫度加速度實驗考察了微乳口服液的穩(wěn)定性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：微乳液滴呈圓球形，平均粒徑34.8nm，丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量分

8、別0.565mg/mL、6.07mg/mL；實驗中制備的微乳體系性質(zhì)穩(wěn)定，高速離心未見分層，在室溫和40℃條件下避光放置3個月未見破乳現(xiàn)象發(fā)生，但丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量均不同程度的降低。 3、丹參酮和丹酚酸復(fù)合微乳的藥效學(xué)比較 通過測定不同給藥組高脂血癥大鼠15s-1、30s-1、150s-1全血粘度、紅細(xì)胞壓積、血小板最大聚集率等指標(biāo)，比較丹參酮和丹酚酸復(fù)合微乳與空白微乳、丹酚酸微乳、丹參酮混懸液、丹參酮微乳分別改

9、善高脂血癥大鼠血液流變學(xué)的效果差異。結(jié)果表明：丹參酮、丹酚酸對ADP誘導(dǎo)的血小板聚集、15s-1、30s-1、150s-1全血粘度均有降低作用，其作用機制可能與減少自由基產(chǎn)生有關(guān)。其中丹酚酸對于降低高脂血癥大鼠的全血粘度作用更顯著，丹參酮對于抑制血小板聚集功能更為顯著。二者聯(lián)合用藥(丹參復(fù)合微乳)可以同時顯著降低高脂血癥大鼠的全血粘度、抑制血小板聚集，其效果具有優(yōu)于二者單獨給藥(丹參酮微乳、丹酚酸微乳)的趨勢。藥物給藥劑型不同，藥物療效

10、不同。丹參酮是脂溶性二萜醌類成份，采用微乳載藥體系給藥可以明顯促進藥物的吸收、提高藥物的生物利用度，其作用效果顯著優(yōu)于丹參酮混懸液組。 通過測定不同給藥組大鼠經(jīng)舌下靜脈注射垂體后葉素誘導(dǎo)的急性心肌缺血后血清中的磷酸肌酸激酶(PCK)、乳酸脫氫酶(LDH)、丙二醛(MDA)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性，比較丹參酮和丹酚酸復(fù)合微乳與空白微乳、丹酚酸微乳、丹參酮混懸液、丹參酮微乳分別對注射垂體后葉素誘導(dǎo)的急性心肌缺血的改善效