磁共振功能成像方法評(píng)價(jià)P選擇素單抗對(duì)狼瘡性腎炎腎損害的干預(yù)作用.pdf

1、狼瘡性腎炎(LN)是我國(guó)最常見(jiàn)的繼發(fā)性腎小球腎炎之一，主要臨床表現(xiàn)為蛋白尿、血尿，嚴(yán)重者可出現(xiàn)腎病綜合征，甚至腎功能不全。2003年國(guó)際腎臟病協(xié)會(huì)和腎臟病理組織(ISN/RPS)主要依據(jù)腎小球病變情況對(duì)LN進(jìn)行了分型。事實(shí)上，60％～70％ LN患者可出現(xiàn)不同程度的腎小管損害、腎間質(zhì)炎癥和纖維化，而且腎小管間質(zhì)病變的嚴(yán)重程度直接影響了LN的進(jìn)展速度和預(yù)后。
　　在LN的小管間質(zhì)病變發(fā)生過(guò)程中，免疫損傷可能導(dǎo)致腎血管內(nèi)皮細(xì)胞活化、組

2、織缺血缺氧，腎內(nèi)活性氧(ROS)大量產(chǎn)生，在ROS、P-選擇素以及促分裂素原活化蛋白激酶作用下中性粒細(xì)胞聚集粘附，進(jìn)而加重了腎小管間質(zhì)損傷。細(xì)胞黏附分子P-選擇素主要表達(dá)在活化的血小板/內(nèi)皮細(xì)胞表面，是在炎癥早期介導(dǎo)中性粒細(xì)胞于血管內(nèi)皮滾動(dòng)和初始黏附的關(guān)鍵成分，可促使炎癥部位中性粒細(xì)胞募集，在LN小管間質(zhì)病變中可能起到重要作用。
　　本研究利用磁共振(MR)功能成像方法觀察經(jīng)P-選擇素單克隆抗體治療前后LN動(dòng)物模型（MRL/lpr

3、小鼠）腎臟的功能、缺氧狀態(tài)和病理變化，探討LN腎小管間質(zhì)病變的病理機(jī)制以及P-選擇素單抗對(duì)LN的早期干預(yù)和治療作用，同時(shí)探討MR功能成像在狼瘡性腎炎腎臟病變、氧合水平的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和療效評(píng)估方面的價(jià)值。
　　研究的第一部分對(duì)65例LN患者和16例健康志愿者進(jìn)行了腎臟擴(kuò)散加權(quán)成像(DWI)及血氧水平依賴法(BOLD)成像。分析LN患者的腎臟表觀擴(kuò)散系數(shù)(ADC)和表觀自旋-自旋弛豫率（R2*）值與臨床指標(biāo)和病理改變的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)LN腎

4、臟的ADC值為(2.40±0.25)×10-3 mm2/s，皮、髓質(zhì)R2*值分別為11.03±1.60/sec和14.05±3.38/sec，均顯著低于正常腎臟測(cè)值（分別P=0.048，P=0.045和P=0.008）。LN腎臟ADC值與eGFR顯著相關(guān)(r=0.510，P＜0.01)，與腎臟病理慢性指數(shù)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.249，P＜0.05)。髓質(zhì)R2*值與24小時(shí)尿蛋白、腎小管間質(zhì)病變程度均呈負(fù)相關(guān)（r分別為-0.244和-0.2

5、42，P＜0.05）。65例LN患者中16例經(jīng)過(guò)9～12個(gè)月免疫誘導(dǎo)治療后再次行MR功能成像，發(fā)現(xiàn)完全緩解者腎臟ADC值和R2*值較前顯著升高。研究表明DWI成像和BOLD成像檢查為動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)LN腎功能損害和腎組織病理改變提供了一種無(wú)創(chuàng)性方法，可能為臨床干預(yù)的療效評(píng)價(jià)提供依據(jù)。
　　研究的第二部分以自發(fā)性LN模型MRL/lpr小鼠作為研究對(duì)象，其尿蛋白、血清肌酐、抗ds-DNA抗體均顯著高于對(duì)照組C57BL/6小鼠，自12周齡起腎小

6、球系膜細(xì)胞增生、基底膜增厚，腎小管上皮細(xì)胞脫落，腎間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤(rùn)，尤其是血管周圍炎細(xì)胞大量聚集。采用免疫組化、Western blot方法發(fā)現(xiàn)在LN模型小鼠腎組織中有缺氧探針HypoxyprobeTM-1、缺氧標(biāo)志物HIF-1α和對(duì)組織缺氧有保護(hù)作用的HO-1蛋白廣泛分布，并與腎小管間質(zhì)病變密切相關(guān)，MR功能成像腎臟ADC值與尿蛋白、血肌酐呈負(fù)相關(guān)，平均R2*值與尿蛋白、腎小管間質(zhì)病變程度及腎組織缺氧指標(biāo)表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)。結(jié)果提示腎內(nèi)缺氧

7、是導(dǎo)致LN腎小管間質(zhì)病變的關(guān)鍵因素之一，功能MRI可反映LN腎臟病變及腎內(nèi)缺氧情況。
　　研究的第三部分采用免疫組化、Western blot和實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法發(fā)現(xiàn)LN小鼠腎組織中P-選擇素蛋白和mRNA表達(dá)顯著上調(diào)。采用P-選擇素單抗對(duì)MRL/lpr小鼠進(jìn)行早期干預(yù)，缺氧探針HypoxyprobeTM-1、HIF-1α和HO-1蛋白分布和mRNA表達(dá)較未干預(yù)組和生理鹽水對(duì)照組均下降，且腎小管間質(zhì)病變的嚴(yán)重程度減輕。MR功能

8、成像R2*值與腎小管間質(zhì)病變程度及腎組織缺氧指標(biāo)表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)。提示P-選擇素在LN腎組織表達(dá)上調(diào)，可能參與啟動(dòng)LN腎小管間質(zhì)早期的炎癥反應(yīng)和病理?yè)p傷，BOLD-MRI可動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)LN干預(yù)前后腎內(nèi)氧合狀態(tài)。
　　總之，本研究表明腎內(nèi)缺氧可能是導(dǎo)致LN腎小管間質(zhì)病變的一個(gè)關(guān)鍵因素，P-選擇素單抗干預(yù)可改善LN腎內(nèi)缺氧及腎小管間質(zhì)病變程度，功能MRI為動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)LN腎臟病變、氧合水平和療效評(píng)價(jià)提供了一種無(wú)創(chuàng)性方法，對(duì)于臨床上LN的早期診治