人纖溶酶原Kringle 5基因的結(jié)構(gòu)改造及其在大腸桿菌中的表達(dá)、純化與鑒定.pdf

1、學(xué)校代碼：10610學(xué)號(hào)：S042945四川大學(xué)碩士學(xué)位論文題目：厶紅溶酶廈煎!i凸g!曼墨基因的結(jié)掏塑造盈甚查太腸拄董蟲的麥達(dá)!純絲皇鑒定二oo七年五月四川大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要人纖溶酶原Kringle5基因的結(jié)構(gòu)改造及其在大腸桿菌中的表達(dá)、純化與鑒定研究生查曉軍導(dǎo)師翟朝陽(yáng)教授背景與目的病理性血管生成是腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，因而阻斷或抑制新生血管的生成是抗腫瘤治療的有效策略。同時(shí)病理性血管生成也見(jiàn)于糖尿病視網(wǎng)膜病變、動(dòng)脈粥樣

2、硬化、慢性風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等多種疾病。近年來(lái)人們對(duì)血管的生成機(jī)制進(jìn)行了廣泛深入地研究，已證明血管的生成受多種相關(guān)因子的調(diào)節(jié)，相繼發(fā)現(xiàn)了多種血管生成因子和血管生成抑制因子。以血管生成為靶點(diǎn)治療腫瘤已成為腫瘤治療研究的熱點(diǎn)，有多種血管生成抑制劑相繼進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。人纖溶酶原Kringle5(簡(jiǎn)稱KS)是新近發(fā)現(xiàn)的一種血管生成抑制因子，它是人纖溶酶原中的第五個(gè)餅環(huán)區(qū)(即Kringle環(huán))，約有80多個(gè)氨基酸殘基，分子量約為14kDa，其中Kri

3、ngle環(huán)含有嚴(yán)格保守的3個(gè)二硫鍵。它能作用于增生的血管內(nèi)皮細(xì)胞，抑制細(xì)胞的增殖、遷移，并能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，是最強(qiáng)的內(nèi)源性血管增生抑制劑之一。但K5的具體作用機(jī)制目前還不明確。在研究K5作用機(jī)制的同時(shí)，通過(guò)改造它的結(jié)構(gòu)以提高其活性成為另一研究熱點(diǎn)。近來(lái)，有學(xué)者通過(guò)基因工程方法除去了K5環(huán)兩邊的氨基酸臂，保留了三個(gè)完整的二硫鍵，獲得了一個(gè)突變的K5(即liteK5)。這種K5突變體在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出更高的活性，其抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增生的能力約