電針刺激對成年大鼠視神經(jīng)切斷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞存活的保護及機制探討.pdf

1、目的：研究不同穴位和頻率的電針刺激對成年大鼠視神經(jīng)切斷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞（節(jié)細胞）存活的作用，并探討電針刺激對受損節(jié)細胞的保護機制。
　　實驗一：隨機選取54只SD大鼠，切斷右側(cè)視神經(jīng)并用熒光金（FluoroGold,FG）逆行性標記節(jié)細胞后，隨機分為9組：對照組（含2、7和14d對照組）及不同穴位、頻率和傷后存活時間組合的電針組（含假穴4/20Hz電針7d組、百會穴4/20Hz電針7d組、睛明穴2Hz電針7d組、睛明穴4/20H

2、z電針2、7、14d組），每組6只動物。對應時間點處死動物取右眼視網(wǎng)膜后計數(shù)被熒光金標記的節(jié)細胞并計算相應的密度（細胞/mm2），數(shù)值用Mean±SEM表示。結(jié)果：（1）睛明穴4/20Hz電針7d組存活節(jié)細胞平均密度（1600±72）顯著高于對照（1104±41）、假穴（1222±68）和百會穴（1168±56）組（P<0.01），而假穴和百會穴組與對照組間無顯著性差異；（2）睛明穴2Hz與睛明穴4/20Hz電針7d組節(jié)細胞密度雖無顯著

3、性差異，但均顯著高于對照7d組（P<0.01）；（3）分別以4/20Hz電針刺激睛明穴2、7、14d，與對照組相同時間點相比，僅在傷后7d出現(xiàn)節(jié)細胞密度的顯著增高（P<0.01）。
　　實驗二：隨機選取60只大鼠并隨機分為10組，即正常組、假手術(shù)2、7、14d組（手術(shù)暴露右側(cè)視神經(jīng)但不切斷），另外36只大鼠切斷右側(cè)視神經(jīng)后再隨機分為2、7、14d對照組和2、7、14d電針組（即2、7、14d睛明穴4/20Hz電針組），每組6只動物

4、。于各組相應時間點麻醉動物后取動物右眼收集房水，并利用高效液相色譜檢測其谷氨酸濃度（μmol/L），數(shù)值用Mean±SEM表示。結(jié)果：對照2、7、14d組（濃度分別為59.74±4.62、88.17±1.94、56.56±1.15）及電針2、7、14d組（濃度分別為47.62±4.29、54.72±1.98、52.27±1.16）房水谷氨酸濃度均顯著高于正常組及2、7、14d假手術(shù)組（濃度分別為43.54±0.53、43.71±0.66

5、、43.21±0.94、43.04±0.44）（P<0.01）；電針2、7d組房水谷氨酸濃度分別顯著低于對照組2、7d組（P<0.01）；電針14d組房水谷氨酸濃度與對照14d組無差異。
　　實驗三：隨機選取54只大鼠切斷右側(cè)視神經(jīng)后，隨機分為6組：2、7、14d對照組和2、7、14d電針組（即2、7、14d睛明穴4/20Hz電針組），每組9只動物。分別利用免疫組織化學染色、Western-blot方法檢測大鼠視網(wǎng)膜中分別參與谷氨

6、酸重吸收與代謝的谷氨酸轉(zhuǎn)運體-1和谷氨酰胺合成酶的表達。結(jié)果：電針7d組谷氨酸轉(zhuǎn)運體-1表達顯著高于對照7d組（P<0.05）；對照2、14d組分別與電針2、14d組的谷氨酸轉(zhuǎn)運體-1表達無顯著差異。視神經(jīng)切斷后電針組和對照組谷氨酰胺合成酶表達沒有發(fā)生變化。
　　結(jié)論：切斷成年大鼠視神經(jīng)后每日以4/20Hz頻率的電針刺激睛明穴1次，可在傷后7d促進視網(wǎng)膜谷氨酸轉(zhuǎn)運體-1對傷側(cè)眼房水內(nèi)谷氨酸的重吸收，從而降低房水內(nèi)谷氨酸的含量，減輕