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文檔簡(jiǎn)介
1、本試驗(yàn)主要研究中藥復(fù)方和益生素對(duì)熱應(yīng)激大鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)與多樣性的影響。旨在探討大鼠熱應(yīng)激與腸道菌群變化的關(guān)系,進(jìn)而為中藥復(fù)方和益生素干預(yù)熱應(yīng)激的作用機(jī)制提供理論依據(jù)。
實(shí)驗(yàn)大鼠80只隨機(jī)分成四組,每組20只,分別為中藥組、益生素組、熱應(yīng)激組和適溫組。中藥組在熱應(yīng)激下按7mg/kg·BW大鼠重量灌服復(fù)方口服液,益生素組在熱應(yīng)激下灌服與中藥組等體積的0.04%益生素。在熱應(yīng)激后3h、1d、3d、7d進(jìn)行采血,測(cè)定大鼠直腸溫度、外周
2、血白細(xì)胞濃度、血液生化指標(biāo)、血清皮質(zhì)醇濃度和 HSP70含量,觀察小腸黏膜形態(tài),并采其盲腸內(nèi)容物,通過提取基因組總 DNA、構(gòu)建測(cè)序文庫、Illumina MiSeq測(cè)序,得出高質(zhì)量測(cè)序數(shù)據(jù),進(jìn)行生物信息學(xué)分析中藥復(fù)方和益生素對(duì)動(dòng)物熱應(yīng)激下腸道菌群結(jié)構(gòu)與多樣性的變化。試驗(yàn)結(jié)果如下:
熱應(yīng)激各時(shí)間段,中藥組、益生素組和適溫組大鼠的直腸溫度顯著低于熱應(yīng)激組(P<0.05);試驗(yàn)在3h、1d、7d時(shí),中藥組、益生素組和適溫組大鼠白細(xì)
3、胞濃度均顯著低于熱應(yīng)激組(P<0.05);熱應(yīng)激3h,中藥組和益生素組ALB含量顯著高于熱應(yīng)激組(P<0.05),熱應(yīng)激組ALT和AST含量與適溫組相比極顯著升高(P<0.01),中藥組和益生素組的大鼠血糖含量均分別與熱應(yīng)激組和適溫組相比極顯著降低(P<0.01);熱應(yīng)激7d,中藥組、益生素組和適溫組TP和ALB含量極顯著高于熱應(yīng)激組(P<0.01),且ALT、AST含量均極顯著低于熱應(yīng)激組(P<0.01),與熱應(yīng)激組相比,中藥組、益生
4、素組和適溫組血糖濃度極顯著下降(P<0.01)。
中藥組十二指腸部分腸絨毛上皮細(xì)胞變性,脫落;空腸和回腸無明顯病變。益生素組和適溫組小腸各段無明顯組織學(xué)變化。熱應(yīng)激組十二指腸部分腸絨毛嚴(yán)重變性,脫落;空腸腸絨毛上皮細(xì)胞變性,部分腸絨毛斷裂,脫落;回腸基底層部分腸絨毛斷裂,脫落。
試驗(yàn)在第1d、3d、7d,中藥組、益生素組和適溫組血清皮質(zhì)醇濃度顯著(P<0.05)和極顯著低于熱應(yīng)激組的血清皮質(zhì)醇濃度(P<0.01);在
5、試驗(yàn)3h和3d,中藥組、益生素組和適溫組血清HSP70濃度均極顯著低于熱應(yīng)激組(P<0.01)。
中藥組和益生素組腸道菌群 Chao1指數(shù)和 Shannon指數(shù)顯著高于熱應(yīng)激組(P<0.05),熱應(yīng)激組Chao1指數(shù)和PD_whole_tree指數(shù)顯著低于適溫組(P<0.05);PCA和PCoA的分析顯示,中藥組、益生素組和熱應(yīng)激組的腸道菌群開始出現(xiàn)差異性,呈分開趨勢(shì),熱應(yīng)激7d,適溫組與其余三個(gè)組的散點(diǎn)、熱應(yīng)激組與其余三個(gè)組
6、散點(diǎn),還有適溫組與熱應(yīng)激組散點(diǎn)完全分開,而中藥組與益生素組的散點(diǎn)基本交疊。
熱應(yīng)激下腸道微生物一些優(yōu)勢(shì)菌屬發(fā)生了變化,厚壁菌和擬桿菌的菌屬相對(duì)減少(P>0.05),乳酸菌屬極顯著減少(P<0.01),梭菌屬增加,中藥組擬桿菌屬和益生素組的乳酸菌屬與熱應(yīng)激組相比顯著升高(P<0.05)。
功能基因的KEGG統(tǒng)計(jì)分析可知,熱應(yīng)激組在糖代謝、氨基酸代謝和膜轉(zhuǎn)運(yùn)的基因表達(dá)活躍,中藥組、益生素組和適溫組各生物途徑相似,且中藥組
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