醛固酮瘤和正常腎上腺中長鏈非編碼RNA表達譜差異的研究.pdf

1、研究背景:原發(fā)性醛固酮增多癥（簡稱原醛）是內分泌相關性高血壓最常見的病因。目前發(fā)現(xiàn)原醛的亞型有很多種，其中產醛固酮瘤最為常見，約占原醛患者的60％。然而，其腎上腺皮質腫瘤的發(fā)生和醛固酮過度分泌的分子機制至今不明。長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA，lncRNA)是一類長度大于200bp，可轉錄但不具有蛋白編碼功能的RNA成分。它們具有各種生物學功能，最近發(fā)現(xiàn)其異常表達可能與多種疾病的發(fā)生有關。
　　研究目的:

2、觀察醛固酮瘤與正常腎上腺組織中l(wèi)ncRNA表達譜的差異并對差異表達的lncRNA進行初步的信息學分析，為進一步探討其調控機制奠定基礎。研究對象和方法:分別提取6例醛固酮瘤和6例正常腎上腺組織的RNA，分離純化后反轉錄成cRNA，生成具有熒光標記的cRNA產物后，利用lncRNA芯片技術檢測醛固酮瘤組和正常腎上腺組中l(wèi)ncRNA表達譜的差異。對原始數(shù)據(jù)進行處理、均一化后篩選出有差異表達的lncRNA，進行統(tǒng)計學和生物信息學分析。然后收集1

3、0例醛固酮瘤組織和9例正常腎上腺組織，從芯片篩選出的差異表達lncRNA中隨機選取4條，用real-time PCR技術對芯片結果進行驗證。
　　研究結果:lncRNA芯片一共檢測出16160條lncRNA。將醛固酮瘤組與正常對照組進行比較:其中變化在1.5倍以上且差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)的認為是表達有差異的lncRNA。與正常對照組相比，醛固酮瘤組中表達有差異的lncRNA一共檢測到1809條，其中1181條表達上調，

4、628條表達下調。Real-timePCR結果顯示隨機選取的四條lncRNA中，有兩條lncRNA表達有明顯差異，另外兩條的表達差異無統(tǒng)計學意義。
　　研究結論:本次研究首次通過芯片技術對醛固酮瘤中l(wèi)ncRNA表達譜的變化進行了檢測。結果顯示與正常對照組相比，醛固酮瘤存在lncRNA的表達改變。驗證結果提示應用芯片結果仍需要對有表達改變的lncRNA在擴大的臨床樣本中進一步證實。這些差異表達的lncRNA可能為進一步闡明醛固酮瘤發(fā)