2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩75頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、目的:通過(guò)生物學(xué)芯片對(duì)正常與骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)人群進(jìn)行l(wèi)ncRNA-mRNA表達(dá)譜分析,對(duì)異常表達(dá)的lncRNA及mRNA采用生物信息學(xué)進(jìn)行分析研究,初步探討lncRNA在OA的發(fā)生發(fā)展中的作用,尋找與OA發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的lncRNA和mRNA,為進(jìn)一步研究OA的表觀遺傳機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
  方法:⑴分別對(duì)正常膝關(guān)節(jié)軟骨組織(5例)與膝關(guān)節(jié)OA軟骨組織(5例)標(biāo)本應(yīng)用Affymetrix基因芯片技術(shù)進(jìn)行

2、lncRNA及mRNA的表達(dá)譜的分析,篩選具有差異性的lncRNA及mRNA,構(gòu)建出OA差異lncRNA及mRNA的表達(dá)譜。⑵用基因功能注釋(GO分析)對(duì)差異性的mRNA進(jìn)行功能注釋,預(yù)測(cè)差異表達(dá)的mRNA高富集的生物學(xué)過(guò)程、細(xì)胞組成和分子功能。⑶用KEGG信號(hào)通路分析對(duì)差異性的mRNA信號(hào)通路注釋,預(yù)測(cè)差異表達(dá)的mRNA高富集的生物學(xué)信號(hào)通路。⑷對(duì)差異表達(dá)基因中相關(guān)系數(shù)最高的500個(gè)lncRNA-mRNA關(guān)系對(duì)采用共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)(co-e

3、xpression)分析進(jìn)行預(yù)測(cè)。⑸根據(jù)KEGG通路信號(hào)分析結(jié)果挑選出與OA發(fā)生密切相關(guān)、擬深入進(jìn)行研究的信號(hào)通路(PI3K-Akt),從已構(gòu)建的差異性lncRNA及mRNA表達(dá)譜中選出與之相關(guān)的lncRNA及mRNA,采用共表達(dá)(co-expression)分析計(jì)算這些lncRNA-mRNA關(guān)系對(duì)之間的相關(guān)系數(shù),并構(gòu)建共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)分析相互作用關(guān)系。(6)篩選出差異表達(dá)倍數(shù)較高且功能作用不明確的4條lncRNA及4條mRNA,運(yùn)用QPCR

4、方法在30例關(guān)節(jié)軟骨組織(其中OA組中19例,正常組中11例)對(duì)其表達(dá)水平進(jìn)行驗(yàn)證。
  結(jié)果:①基因芯片分析結(jié)果表明,與正常組相比,檢測(cè)到膝關(guān)節(jié)OA軟骨組織中有2042個(gè)lncRNA表達(dá)有差異,其中1137個(gè)上調(diào),905個(gè)下調(diào),上調(diào)最明顯的lncRNA為lnc-SAMD14-4,下調(diào)最明顯的為lnc-MSMP-2;對(duì)OA組和正常組的mRNA進(jìn)行芯片分析,檢測(cè)到2011個(gè)mRNA具有差異性表達(dá),其中有1386個(gè)mRNA上調(diào),625

5、個(gè)mRNA下調(diào),其中MMP-13編碼mRNA上調(diào)最明顯,MYOC編碼mRNA下調(diào)最明顯。②GO功能注釋分析結(jié)果顯示,上調(diào)的mRNA富集程度最高的分別為細(xì)胞外基質(zhì)組成(extracellular matrixorganization,GO:0030198)、基質(zhì)外泌體(extracellular exosome,GO:0070062)和膠原結(jié)合(collagen binding,GO:0005518);下調(diào)的mRNA富集程度最高的分別為蛋

6、白質(zhì)穩(wěn)定性(protein stabilization,GO:0050821)、纖毛相關(guān)(cilium,GO:0005929)和硫酸乙酰肝素蛋白多糖結(jié)合(heparan sulfate proteoglycan binding,GO:0043395)。③KEGG通路分析共檢測(cè)出有27條信號(hào)通路與上調(diào)的mRNA相關(guān),其中富集程度最高前3位通路分別是黏合斑(focal adhesion)、癌癥相關(guān)通路(Pathways in cancer)

7、、磷脂酰肌醇3-激酶通路(PI3K-Akt);94條信號(hào)通路與下調(diào)的mRNA相關(guān),其中富集程度最高的3條通路分別是細(xì)胞色素P450、谷胱甘肽代謝(Glutathione metabolism)、細(xì)胞色素P450的異物代謝(Metabolism of xenobiotics by cytochrome P450)。④納入差異表達(dá)基因中相關(guān)系數(shù)最高的500個(gè)lncRNA-mRNA關(guān)系對(duì)以及PI3K-Akt通路相關(guān)的lncRNA-mRNA相互

8、作用對(duì),構(gòu)建了lncRNA-mRNA共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)。⑤選擇差異表達(dá)倍數(shù)較高且功能作用不明確的4個(gè)lncRNA(lnc-SAMD14-4、lnc-MARCKS-7、lnc-MSMP-2和lnc-NPVF-4)和4個(gè)mRNA(SERPINF1、POSTN、MYOC和PAK3)進(jìn)行qPCR驗(yàn)證,其中 lnc-SAMD14-4、 lnc-MARCKS-7、SERPINF1 mRNA和POSTNmRNA在OA軟骨組織中表達(dá)上調(diào);lnc-MSMP-2、

9、lnc-NPVF-4、MYOC mRNA和PAK3 mRNA在OA軟骨組織中表達(dá)下調(diào),表達(dá)趨勢(shì)與芯片篩選結(jié)果一致。
  結(jié)論:lncRNA與OA的發(fā)生機(jī)制有關(guān),可能是其表觀遺傳致病因素之一;lncRNA(lnc-SAMD14-4、lnc-MARCKS-7、lnc-MSMP-2和lnc-NPVF-4)和mRNA(SERPINF1、POSTN、MYOC和PAK3)可能與OA發(fā)生發(fā)展有關(guān);lncRNA可能通過(guò)對(duì)應(yīng)的mRNA參與基質(zhì)組成、

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論