蘇氨酸脫氫酶在體細(xì)胞重編程過程中的作用的研究及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力引起細(xì)胞周期阻滯的分子機(jī)制的研究.pdf

1、目前的許多研究表明:代謝方式的改變（例如:糖代謝），在細(xì)胞的重編程過程中發(fā)揮著重要的作用。在之前的研究中發(fā)現(xiàn):L-蘇氨酸脫氫酶(TDH)是胚胎干細(xì)胞中特異性表達(dá)的基因，并且在蘇氨酸的代謝中發(fā)揮著重要的作用;蘇氨酸脫氫酶的酶活性是干細(xì)胞快速生長所必須的。但是蘇氨酸脫氫酶在細(xì)胞重編程的過程中是否發(fā)揮作用，目前還沒有任何的報(bào)道。在我們的研究中發(fā)現(xiàn):蘇氨酸脫氫酶在細(xì)胞的重編程過程中發(fā)揮著重要的作用;降低蘇氨酸脫氫酶的表達(dá)，極大的抑制了細(xì)胞的重編

2、程效率;反之，過表達(dá)蘇氨酸脫氫酶顯著的增加了多潛能干細(xì)胞的誘導(dǎo)效率。同時(shí)在我們的進(jìn)一步研究中發(fā)現(xiàn)，miR-9可以通過調(diào)節(jié)蘇氨酸脫氫酶的蛋白水平的表達(dá)來抑制細(xì)胞的重編程效率;同時(shí)蘇氨酸脫氫酶可以和精氨酸甲基化轉(zhuǎn)移酶(PRMT5)相互作用，PRMT5可以通過甲基化依賴和非依賴的方式來影響蘇氨酸脫氫酶的活性，從而影響了細(xì)胞的重編程的效率。綜述所述，蘇氨酸脫氫酶通過調(diào)節(jié)蘇氨酸的代謝來調(diào)控細(xì)胞的重編程過程。
　　 各種各樣的原因會(huì)導(dǎo)致未折

3、疊蛋白或者錯(cuò)誤折疊的蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)的積累，這種積累可以激活細(xì)胞內(nèi)的一條重要的壓力反應(yīng)信號(hào)通路叫做非折疊蛋白反應(yīng)即UPR反應(yīng)。非折疊蛋白反應(yīng)可以通過誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)的分子伴侶的增加或者減少蛋白質(zhì)的合成來減少內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的非正確折疊的蛋白的積累。同時(shí)非折疊蛋白反應(yīng)還可以誘導(dǎo)細(xì)胞的周期阻滯，使細(xì)胞周期阻滯在G1期。然而非折疊蛋白應(yīng)激反應(yīng)所誘導(dǎo)的細(xì)胞周期阻滯的具體分子機(jī)制還不是特別的清楚。在我們的研究中發(fā)現(xiàn):我們使用衣霉素，一種誘導(dǎo)細(xì)胞非折疊蛋白反應(yīng)的

4、藥物，處理黑色素瘤細(xì)胞能夠促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)與周期阻滯相關(guān)的蛋白P27的增加;同時(shí)誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯在G1期。在本文中我們揭示了P27積累的原因是由于它的泛素化修飾的減少;從而使其蛋白水平的降解減少。隨著進(jìn)一步的研究我們發(fā)現(xiàn)，p27蛋白水平的增加是由于它的主要的泛素化連接酶skp2的減少造成的;在衣霉素處理黑色素瘤時(shí)，skp2的mRNA水平會(huì)下降，因此造成了蛋白水平的下降。同時(shí)我們將p27蛋白水平敲低，減少了衣霉素誘導(dǎo)的細(xì)胞周期阻滯。因此在本文中