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文檔簡介
1、目的: 研究γ-氨基丁酸(GABA)及其A受體激動劑(THIP)對人細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)的增殖、凋亡、T細(xì)胞亞群和殺瘤活性的影響和作用機(jī)制。 方法: 體外培養(yǎng)人CIK細(xì)胞成熟后,使用不同濃度的GABA和THIP作用于人CIK細(xì)胞,應(yīng)用MTT比色法和流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測上述兩種物質(zhì)作用前后人CIK細(xì)胞的增殖、凋亡、細(xì)胞周期和免疫表型的變化,采用乳酸脫氫酶(LDH)法檢測人CIK細(xì)胞殺傷活性的變化。 結(jié)果:
2、 1.MTT法檢測結(jié)果顯示,GABA在100umol/L~800umol/L濃度時呈劑量依賴性抑制CIK細(xì)胞的生長(P<0.01),THIP能增強(qiáng)GABA的上述作用。單用THIP對CIK細(xì)胞生長亦有明顯的抑制作用。單用GABA和THIP在100umol/L時,THIP對CIK細(xì)胞生長的抑制作用比GABA強(qiáng)。 2.FCM檢測結(jié)果顯示,GABA能夠促進(jìn)CIK細(xì)胞凋亡,細(xì)胞凋亡比例由5.29%上升到13.89%,THIP能增強(qiáng)G
3、ABA的上述作用,使細(xì)胞凋亡率上升至16.89%。隨著藥物濃度的增高,G0/G1期細(xì)胞比例逐漸增加,G2/M、S期細(xì)胞比例逐漸下降。單用THIP對CIK的細(xì)胞周期和凋亡亦有明顯作用。 3.對T細(xì)胞亞群檢測結(jié)果顯示,GABA能夠降低CIK細(xì)胞上的CD28+分子、CD25+分子百分比(P<0.01),提高CD4+T細(xì)胞的百分比,呈劑量依賴性,降低CD8+T細(xì)胞的百分比(P<0.01),THIP與GABA共同作用后能增強(qiáng)GABA的作用
4、。單用THIP對CIK細(xì)胞表面分子亦有明顯作用。 4.LDH法檢結(jié)果顯示,GABA能明顯抑制CIK細(xì)胞對人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480的殺傷活性(P<0.01),呈劑量依賴性,THIP能夠增強(qiáng)GABA的作用。單用THIP對CIK細(xì)胞的殺傷活性亦有明顯的抑制作用(P<0.01)。 結(jié)論: GABA能顯著抑制CIK細(xì)胞的生長,促進(jìn)CIK細(xì)胞凋亡;并能降低CIK細(xì)胞表面分子CD28、CD25分子的表達(dá),降低CD8+T細(xì)胞的百分比;抑
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