γ-氨基丁酸對(duì)人細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞的作用研究.pdf

1、目的: 研究γ-氨基丁酸(GABA)及其A受體激動(dòng)劑(THIP)對(duì)人細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)的增殖、凋亡、T細(xì)胞亞群和殺瘤活性的影響和作用機(jī)制。 方法: 體外培養(yǎng)人CIK細(xì)胞成熟后，使用不同濃度的GABA和THIP作用于人CIK細(xì)胞，應(yīng)用MTT比色法和流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)上述兩種物質(zhì)作用前后人CIK細(xì)胞的增殖、凋亡、細(xì)胞周期和免疫表型的變化，采用乳酸脫氫酶(LDH)法檢測(cè)人CIK細(xì)胞殺傷活性的變化。 結(jié)果:

2、 1.MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示，GABA在100umol/L～800umol/L濃度時(shí)呈劑量依賴(lài)性抑制CIK細(xì)胞的生長(zhǎng)(P<0.01)，THIP能增強(qiáng)GABA的上述作用。單用THIP對(duì)CIK細(xì)胞生長(zhǎng)亦有明顯的抑制作用。單用GABA和THIP在100umol/L時(shí)，THIP對(duì)CIK細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用比GABA強(qiáng)。 2.FCM檢測(cè)結(jié)果顯示，GABA能夠促進(jìn)CIK細(xì)胞凋亡，細(xì)胞凋亡比例由5.29％上升到13.89％，THIP能增強(qiáng)G

3、ABA的上述作用，使細(xì)胞凋亡率上升至16.89％。隨著藥物濃度的增高，G0/G1期細(xì)胞比例逐漸增加，G2/M、S期細(xì)胞比例逐漸下降。單用THIP對(duì)CIK的細(xì)胞周期和凋亡亦有明顯作用。 3.對(duì)T細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果顯示，GABA能夠降低CIK細(xì)胞上的CD28+分子、CD25+分子百分比(P<0.01)，提高CD4+T細(xì)胞的百分比，呈劑量依賴(lài)性，降低CD8+T細(xì)胞的百分比(P<0.01)，THIP與GABA共同作用后能增強(qiáng)GABA的作用

4、。單用THIP對(duì)CIK細(xì)胞表面分子亦有明顯作用。 4.LDH法檢結(jié)果顯示，GABA能明顯抑制CIK細(xì)胞對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480的殺傷活性(P<0.01)，呈劑量依賴(lài)性，THIP能夠增強(qiáng)GABA的作用。單用THIP對(duì)CIK細(xì)胞的殺傷活性亦有明顯的抑制作用(P<0.01)。 結(jié)論: GABA能顯著抑制CIK細(xì)胞的生長(zhǎng)，促進(jìn)CIK細(xì)胞凋亡；并能降低CIK細(xì)胞表面分子CD28、CD25分子的表達(dá)，降低CD8+T細(xì)胞的百分比；抑