激發(fā)型CD28單抗參與的細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)及其對(duì)乳腺癌細(xì)胞的殺傷作用研究.pdf

1、蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書而使用過的材料。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽日期：絲!主：Z：望激發(fā)型CD28單抗參與的細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)及其對(duì)乳腺癌細(xì)胞

2、的殺傷作用研究中文摘要中文摘要細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokineinducedkiller，CIK)是將人體(自體或異體)外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外經(jīng)多種細(xì)胞因子刺激后活化增殖的一群異質(zhì)性細(xì)胞群。它具有增殖能力強(qiáng)、殺瘤活性高、抗瘤譜廣及不受MHC(majorhistocompatibilitycomplex，MHC)限制性等特點(diǎn)。特別是對(duì)術(shù)后清除微小轉(zhuǎn)移灶、防止擴(kuò)散及復(fù)發(fā)，提高患者自身抗腫瘤免疫能力具有重要作用。CD28是表達(dá)于人類T

3、細(xì)胞以及部分NK細(xì)胞表面的重要分子，T細(xì)胞的CD28作為受體分子與抗原提呈細(xì)胞(antigenpresentingcell，APC)表達(dá)的B7分子結(jié)合介導(dǎo)T細(xì)胞活化所需的協(xié)同刺激信號(hào)，從而激發(fā)T細(xì)胞的增殖與發(fā)揮免疫效應(yīng)。激發(fā)型的CD28抗體與CD28分子結(jié)合后可直接轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞活化信號(hào)，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞的增殖與發(fā)揮免疫效應(yīng)。本研究旨在自行制備鼠抗人激發(fā)型CD28單抗的基礎(chǔ)上，聯(lián)合不同細(xì)胞因子體外誘導(dǎo)CIK細(xì)胞，分析該法誘導(dǎo)的CIK的增殖能力、表

4、型特征及對(duì)乳腺癌細(xì)胞株MCF7的殺傷作用，以期尋找安全、高效擴(kuò)增CIK的新方案。第一部分鼠抗人激發(fā)型CD28單克隆抗體的制備及鑒定目的：制備鼠抗人激發(fā)型CD28單克隆抗體并鑒定其生物學(xué)功能。方法：將已建株的分泌鼠抗入激發(fā)型CD28單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量體外擴(kuò)增，采用體內(nèi)誘生腹水法制備單抗并經(jīng)ProteinA親和層析分離純化。間接免疫熒光法鑒定單克隆抗體的效價(jià)，流式細(xì)胞術(shù)分析單克隆抗體對(duì)細(xì)胞膜型CD28分子的結(jié)合能力。結(jié)果：腹水形成率