不同來源細胞因子誘導的殺傷細胞體外殺傷作用差異及其機制的探討.pdf

1、目的：
　　比較患者自身來源的細胞因子誘導的殺傷（CIK）細胞與健康人來源的CIK細胞對肺癌細胞株A549殺傷作用的差異，初步探討差異形成的機制，為臨床應用健康人CIK細胞治療惡性腫瘤提供理論依據。
　　內容：
　　1.健康人與惡性腫瘤患者來源的PBMC和CIK細胞對肺癌細胞A549體外殺傷作用比較；
　　2.健康人與惡性腫瘤患者來源的PBMC和CIK細胞表面活性受體NKG2D表達水平的差異；
　　3.健康

2、人與惡性腫瘤患者來源的PBMC和CIK細胞表型分析的比較；
　　4.健康人與惡性腫瘤患者血漿中的NKG2D可溶性配體sMICA水平的差異。
　　方法：
　　1.健康人、惡性腫瘤患者各抽取足量外周靜脈血，離心所得血漿用作sMICA水平檢測。
　　2.外周靜脈血經密度梯度離心后獲取單個核細胞，依次加入IFN-γ、CD3mAb、IL-2等細胞因子，誘導培養(yǎng)成CIK細胞。
　　3. LDH細胞毒性檢測試劑盒檢測兩種

3、來源PBMC和CIK細胞在體外對肺癌細胞株A549的殺傷活性。
　　4.應用流式細胞儀技術對兩種來源PBMC和CIK細胞作表型分析，及檢測PBMC和CIK細胞NKG2D受體的表達情況。
　　結果：
　　1.各組PBMC經細胞因子誘導前殺傷活性無顯著性差異，經細胞因子誘導以后各組CIK細胞殺傷活性均較誘導前有提高，健康人組與晚期病人組間誘導后、前差值比較，健康人誘導后CIK細胞殺傷活性提高較晚期病人明顯。
　　2.

4、細胞因子誘導前，健康人與各組患者間細胞表型與 NKG2D表達未見明顯差異，細胞因子誘導后，CD3+CD56+及NK細胞NKG2D比例在健康人中較晚期惡性腫瘤患者高，細胞因子誘導后與誘導前相比，健康人CD3+CD56+細胞比例及NKG2D在多個亞群細胞中升高較晚期惡性腫瘤患者明顯。
　　3.晚期惡性腫瘤患者血漿游離MICA水平較健康人高。
　　結論：
　　從患者和健康人外周血提取的PBMC能通過細胞因子誘導成CIK細胞，