不同來源細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞體外殺傷作用差異及其機(jī)制的探討.pdf

1、目的：
　　比較患者自身來源的細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷（CIK）細(xì)胞與健康人來源的CIK細(xì)胞對(duì)肺癌細(xì)胞株A549殺傷作用的差異，初步探討差異形成的機(jī)制，為臨床應(yīng)用健康人CIK細(xì)胞治療惡性腫瘤提供理論依據(jù)。
　　內(nèi)容：
　　1.健康人與惡性腫瘤患者來源的PBMC和CIK細(xì)胞對(duì)肺癌細(xì)胞A549體外殺傷作用比較；
　　2.健康人與惡性腫瘤患者來源的PBMC和CIK細(xì)胞表面活性受體NKG2D表達(dá)水平的差異；
　　3.健康

2、人與惡性腫瘤患者來源的PBMC和CIK細(xì)胞表型分析的比較；
　　4.健康人與惡性腫瘤患者血漿中的NKG2D可溶性配體sMICA水平的差異。
　　方法：
　　1.健康人、惡性腫瘤患者各抽取足量外周靜脈血，離心所得血漿用作sMICA水平檢測。
　　2.外周靜脈血經(jīng)密度梯度離心后獲取單個(gè)核細(xì)胞，依次加入IFN-γ、CD3mAb、IL-2等細(xì)胞因子，誘導(dǎo)培養(yǎng)成CIK細(xì)胞。
　　3. LDH細(xì)胞毒性檢測試劑盒檢測兩種

3、來源PBMC和CIK細(xì)胞在體外對(duì)肺癌細(xì)胞株A549的殺傷活性。
　　4.應(yīng)用流式細(xì)胞儀技術(shù)對(duì)兩種來源PBMC和CIK細(xì)胞作表型分析，及檢測PBMC和CIK細(xì)胞NKG2D受體的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.各組PBMC經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)前殺傷活性無顯著性差異，經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)以后各組CIK細(xì)胞殺傷活性均較誘導(dǎo)前有提高，健康人組與晚期病人組間誘導(dǎo)后、前差值比較，健康人誘導(dǎo)后CIK細(xì)胞殺傷活性提高較晚期病人明顯。
　　2.

4、細(xì)胞因子誘導(dǎo)前，健康人與各組患者間細(xì)胞表型與 NKG2D表達(dá)未見明顯差異，細(xì)胞因子誘導(dǎo)后，CD3+CD56+及NK細(xì)胞NKG2D比例在健康人中較晚期惡性腫瘤患者高，細(xì)胞因子誘導(dǎo)后與誘導(dǎo)前相比，健康人CD3+CD56+細(xì)胞比例及NKG2D在多個(gè)亞群細(xì)胞中升高較晚期惡性腫瘤患者明顯。
　　3.晚期惡性腫瘤患者血漿游離MICA水平較健康人高。
　　結(jié)論：
　　從患者和健康人外周血提取的PBMC能通過細(xì)胞因子誘導(dǎo)成CIK細(xì)胞，