β-欖香烯對卵巢癌細胞耐藥株A2780-PTX的逆轉(zhuǎn)作用研究.pdf

1、目的:研究β-欖香烯對人卵巢癌細胞株A2780及其耐藥細胞株A2780/PTX的抑制、增敏及逆轉(zhuǎn)耐藥性作用,探討其可能的作用機制。
　　方法:本實驗采用人卵巢癌細胞株A2780及其耐藥細胞株A2780/PTX為研究對象,實驗組用含不同濃度(1.25ug/ml、2.5ug/ml、5ug/ml、10ug/ml、20ug/ml、40ug/ml、80ug/ml、160ug/ml、320ug/ml、640ug/ml)β-欖香烯DMEM_H培

2、養(yǎng)液進行培養(yǎng),采用MTT法測定不同濃度β-欖香烯對其的生長抑制率;以不同濃度的紫杉醇(0.5ng/ml、1ng/ml、2ng/ml、4ng/ml、8ng/ml、16ng/ml、32ng/ml、64ng/ml、128ng/ml、256ng/ml),單獨或聯(lián)合低毒性劑量的β-欖香烯(30ug/ml)作用人卵巢癌細胞株A2780及其耐藥細胞株A2780/PTX,MTT法檢測β-欖香烯對A2780/PTX細胞的增敏作用;β-欖香烯、PTX單獨及

3、聯(lián)合作用A2780/PTX細胞,流式細胞儀檢測對其A2780/PTX細胞周期的影響;Western-blot法檢測50ug/mlβ-欖香烯、10ng/mlPTX及聯(lián)合用藥作用A2780/PTX細胞后P-gp、XIAP和survivin基因表達情況。
　　結(jié)果:
　　1、不同濃度的β-欖香烯作用人卵巢癌細胞株A2780及其耐藥細胞株A2780/PTX,可抑制卵巢癌細胞A2780及耐藥株的生長,IC50分別為76.96ug/ml

4、(A278024h)、100.7ug/ml(A2780/PTX24h)、53.06ug/ml(A278048h)及57.27ug/ml(A2780/PTX48h)。
　　2、不同濃度的紫杉醇單獨或聯(lián)合低毒性劑量的β-欖香烯(30ug/ml)作用人卵巢癌細胞株A2780及其耐藥細胞株A2780/PTX,其IC50值分別為6.027ng/ml(A2780+PTX),2.72ng/ml(A2780+PTX+ELE),44.98ng/ml

5、(A2780/PTX+PTX)及10.25ng/ml(A2780/PTX+PTX+ELE)。PTX單獨作用時,耐藥細胞株IC50值是敏感株的7.46倍,而當聯(lián)合β-欖香烯用藥時,耐藥細胞株IC50值是敏感株的3.77倍,下降了一倍;敏感株單獨用藥的IC50值是聯(lián)合用藥時的2.22倍,而耐藥株單獨用藥的IC50值是聯(lián)合用藥時的4.39倍。
　　3、(20ug/ml、50ug/ml)β-欖香烯、(5ng/ml、10ng/ml)PTX單

6、獨給藥均能使A2780/PTX細胞G2/M期比例顯著升高,并與相應藥物劑量呈正相關;而β-欖香烯及PTX聯(lián)合用藥則顯著使細胞累積在G2/M期。
　　4、50ug/mlβ-欖香烯單獨或聯(lián)合10ng/mlPTX用藥均可明顯下調(diào)A2780/PTX細胞P-gp、XIAP和survivin的表達,而PTX單獨用藥時則基本無變化。
　　結(jié)論:
　　1、β-欖香烯乳對人卵巢癌細胞株A2780及其耐藥細胞株A2780/PTX的增殖有明

7、顯的抑制作用,其抑制作用有劑量及時間依賴性。
　　2、β-欖香烯乳在低細胞毒性濃度下對PTX作用的A2780細胞及耐藥株細胞A2780/PTX均有不同程度的增敏作用,并且對耐藥株的作用更強,可顯著逆轉(zhuǎn)PTX的多藥耐藥性。
　　3、β-欖香烯、PTX單獨或聯(lián)合用藥均可使細胞阻滯在G2/M期,二種藥物聯(lián)合使用有正協(xié)同作用,誘導細胞更多累積在G2/M期。
　　4、β-欖香烯單獨或聯(lián)合PTX用藥均可明顯下調(diào)P-gp、XIAP和