白藜蘆醇對囊性纖維化跨膜傳導調節(jié)因子的激活作用.pdf

1、白藜蘆醇（3，5，4'，-三羥基二苯乙烯）屬于天然多酚類化合物，也是一種植物抗毒素當紅葡萄、桑樹、花生等植物受到生物或非生物脅迫（紫外照射、真菌感染等）時，植物能夠自身分泌這種抗毒素起到保護植物的作用。白藜蘆醇具有抗氧化、抗突變、化學預防、抗炎、抗癌等對人體健康有利的生物活性而受到廣泛關注。白藜蘆醇也被認為是降低因攝取大量的高脂、高熱量食物而引發(fā)心血管疾病的原因之一。在2005年，Blumenstein等人發(fā)現(xiàn)了白藜蘆醇可以刺激T84細

2、胞cAMP依賴的氯離子分泌，也可以刺激小鼠腸粘膜中的陰離子分泌。以此為基礎，他們提出了由某些植物中多酚引發(fā)的嚴重腹瀉可能是cAMP水平提高刺激氯離子分泌造成的。最近，Alexander等人證實白藜蘆醇可以在小鼠鼻中隔軟骨細胞( MNSE)和人鼻腔纖毛上皮細胞(HSNE)中增強上皮細胞介導的氯離子轉運活性。到目前為止，雖然白藜蘆醇潛在的作用靶點有很多，但是由白藜蘆醇介導的氯離子分泌機制仍然不明確。
　　囊性纖維化跨膜傳導調節(jié)因子(c

3、ystic fbrosis transmembrane conductance regulator，CFTR)是ATP結合蛋白家族成員，主要在所有哺乳動物與分泌吸收相關組織，如氣管、腸道、生殖道等的上皮細胞上表達，參與氯離子轉運、對體內液體轉運起至關重要的作用。它是液體分泌的主要通道，經(jīng)證實在激活劑刺激時CFTR是氯離子分泌的最終通路。因此推測白藜蘆醇可以激活CFTR氯離子通道活性。
　　本實驗通過細胞熒光測定模型、短路電流以及膜

4、片鉗等技術檢測了白藜蘆醇對野生型和突變型CFTR氯離子通道的激活作用，實驗發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇能夠以劑量依賴的方式激活野生型和突變型CFTR氯離子通道的活性，該活性可被CFTR特異性抑制劑CFTRinh-172和GlyHl01快速、可逆地抑制。白藜蘆醇刺激FRT細胞CFTR表達的半最大效應濃度(EC50)約是80μM。白藜蘆醇對CFTR激活作用雖然依賴于細胞cAMP水平但卻不能提高細胞內cAMP水平。膜片鉗實驗也進一步顯示了白藜蘆醇能顯著提高野