大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及其與新型材料體外細(xì)胞毒性實驗研究.pdf

1、目的：本研究擬探討大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)的分離、培養(yǎng)方法；并通過MSCs與新型可降解脂肪族/芳香族共聚酯材料復(fù)合培養(yǎng)，評價該材料的體外細(xì)胞毒性。 方法：采用梯度離心法和貼壁培養(yǎng)法分離MSCs，對所分離細(xì)胞進行CD29、CD34及CD71免疫組化鑒定，繪制生長曲線，比較不同代數(shù)細(xì)胞的分裂、增殖能力。在體外細(xì)胞毒性實驗研究中，利用MSCs與新型可降解材料復(fù)合培養(yǎng)，聯(lián)合使用浸提液法和直接接觸法，通過中性紅攝取法、堿性品紅染色

2、法、噻唑藍(lán)還原法、吖啶橙/嗅化乙啶染色法和掃描電鏡直接觀察從細(xì)胞活力、細(xì)胞生長情況、線粒體代謝、細(xì)胞膜完整性及細(xì)胞形態(tài)學(xué)等方面對材料的細(xì)胞毒性效應(yīng)進行評價。 結(jié)果：使用以上兩種分離方法分離出MSCs，經(jīng)CD29、CD34及CD71免疫組化鑒定，符合MSCs的特征。通過檢測發(fā)現(xiàn)，體外所檢材料并未導(dǎo)致明顯的細(xì)胞毒性效應(yīng)，細(xì)胞顯示正常的代謝功能和生長能力。 結(jié)論：大鼠MSC可在體外培養(yǎng)(擴增)；三種不同質(zhì)量構(gòu)成比的共聚酯材料均