基于口腔黏膜上皮的膀胱黏膜缺損修復.pdf

1、組織工程技術修復膀胱缺損是一種微創(chuàng)的新方法，技術上能夠替代傳統(tǒng)胃腸道代膀胱及膀胱擴大術。然而在用于臨床常見的膀胱腫瘤時，卻面臨自體尿路上皮細胞（urothelium, UC）無法安全應用的窘境?？谇火つど掀ぜ毎∣ral keratinocytes, OKC）已被成功用于尿道、角膜等上皮的修復，具備替代UC的潛能。 目的：建立組織工程膀胱壁構建的技術平臺，研究自體OKC替代UC修復膀胱黏膜缺損的可行性。 材料與方法：（1

2、）膀胱黏膜下組織通過脫細胞處理制成支架材料，并對膀胱脫細胞基質(zhì)移植物（Bladder acellular matrix graft，BAMG）進行相關評價。進行膀胱平滑肌細胞和尿路上皮細胞的體外培養(yǎng)、鑒定和擴增。分別以BAMG和聚羥基乙酸（polyglycolic acid, PGA）/聚乳酸（polylact acid, PLA）作為支架，體外構建膀胱壁復層結構，并對兩種支架材料進行比較，建立組織工程技術修復膀胱缺損的技術平臺。（2）

3、將游離口腔黏膜瓣植入膀胱，觀察其在膀胱內(nèi)環(huán)境中長期存活的情況及細胞表型的轉(zhuǎn)歸，建立膀胱黏膜缺損的動物模型。（3）以自體OKC作為種子細胞，應用組織工程方法復合BAMG支架材料，修復豬動物模型中的膀胱黏膜層缺損。 結果：（1）BAMG原有細胞成分完成脫除，同時保留基底膜和細胞外基質(zhì)，包括laminin和膠原。BAMG和PGA/PLA都適合作為膀胱壁復層結構體外構建的支架材料。兩種支架各有其優(yōu)點：BAMG機械強度好，便于手術操作，同

4、時保留基底膜和部分細胞外基質(zhì)，更適合上皮細胞單獨接種；而PGA/PLA材料孔隙率大，細胞容易滲透到其內(nèi)部。（2）自體游離口腔黏膜瓣植入膀胱內(nèi)12個月，所有口腔黏膜瓣全部存活，并基本維持復層鱗狀上皮的結構。植入6個月后部分口腔黏膜出現(xiàn)UC特異性蛋白uroplakin II的表達，提示口腔黏膜上皮向膀胱尿路上皮轉(zhuǎn)化的可能性。（3）組織工程OKC和BAMG復合物植入膀胱1月后黏膜層缺損獲得修復。BrdU細胞標記證明，植入膀胱內(nèi)的OKC存活，同