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文檔簡介
1、阿霉素是一種具有自發(fā)熒光特性的葸類抗生素類廣譜抗腫瘤藥物,具有明顯的神經(jīng)毒性。背根神經(jīng)節(jié)是軀干、四肢痛覺的初級傳入神經(jīng)元,是機體內(nèi)外環(huán)境與脊髓連接的紐帶,具有傳輸和調(diào)節(jié)機體的各種感覺,接受和傳遞各種傷害性感受的功能。成年大鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元亦可按胞體大小分3類,分為大中小三種類型,其中的中、小型細胞傳遞的信息與痛覺關系密切。 目的:本實驗是在以往實驗的基礎上,通過建立外周神經(jīng)套管動物模型,探索大鼠阿霉素坐骨神經(jīng)給藥后,不同時間段
2、的背根神經(jīng)節(jié)各型神經(jīng)細胞發(fā)生的形態(tài)學變化是否有差別,進一步了解阿霉素對背根神經(jīng)節(jié)的神經(jīng)毒性是否具有高選擇性、及時間和劑量相關性,為阿霉素的化學性感覺神經(jīng)節(jié)切除術(shù)的臨床應用提供新的理論依據(jù)。 方法:成年SD大鼠40只,體重180~220g,隨機分為2組,為0.33%阿霉素組和1.0%阿霉素組。全麻下暴露大鼠雙側(cè)坐骨神經(jīng),然后銳性橫斷坐骨神經(jīng),將右側(cè)神經(jīng)近心端置入乳硅膠管內(nèi),固定、縫扎,用微量進樣器分別向管內(nèi)注入0.33%和1.0%
3、阿霉素溶液20μl作為試驗側(cè),左側(cè)坐骨神經(jīng)同樣手術(shù),注入等量生理鹽水作為對照側(cè)。按4d、1w、2w、4w、6w的時間順序處死動物取雙側(cè)L5背根神經(jīng)節(jié)標本,制作石蠟切片,HE染色及甲苯胺藍染色,于光鏡下觀察各型背根節(jié)細胞的形態(tài)學變化,對各型節(jié)細胞中出現(xiàn)的異常神經(jīng)元分別計數(shù)。選擇1.0%阿霉素組實驗側(cè)L5神經(jīng)節(jié)標本制作超薄切片,電鏡下分別觀察各型背根節(jié)細胞的超微結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果:1.0.33%阿霉素組1w的實驗側(cè)L5背根節(jié)光鏡下可見
4、各型神經(jīng)元均出現(xiàn)程度不同的細胞水腫,“氣球樣變”的輕微變性改變。除此之外,其后各時段各型神經(jīng)元形態(tài)學變化并無明顯進展。2.1.0%阿霉素組1w注藥側(cè)L5背根節(jié)光鏡下各型神經(jīng)元均顯示細胞腫脹、變性;2w時均可見尼氏小體減少、消失;4w和8w后各型背根節(jié)細胞壞死、消失,神經(jīng)膠質(zhì)細胞增生。實驗觀察期間各型神經(jīng)元光鏡結(jié)果未發(fā)現(xiàn)明顯差別。3.1.0%阿霉素組實驗側(cè)L5背根節(jié)的小神經(jīng)元(平均直徑≤35μm),在用藥后4d、1w、2w與對照側(cè)背根節(jié)細
5、胞形態(tài)有差別的神經(jīng)元數(shù)目顯著多于大神經(jīng)元(平均直徑<35μm)的異常細胞數(shù)(p<0.01)。4.1.0%阿霉素組注藥側(cè)L5背根節(jié)1w時電鏡下小神經(jīng)元出現(xiàn)線粒體腫脹,核膜彎曲不光滑;2w時顯示線粒體腫脹、嵴溶解,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池樣擴張;4w和6w時出現(xiàn)線粒體高度腫脹、崩解,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減少,多聚核糖體解體,核膜不完整。大神經(jīng)元表現(xiàn)為:2w時顯示染色質(zhì)部分溶解,神經(jīng)絲異常聚集;4w和6w的改變相似,可見電子致密物聚集,核周質(zhì)出現(xiàn)空泡,細胞器消失等
6、現(xiàn)象。生理鹽水側(cè)背根節(jié)細胞形態(tài)在整個試驗期間無明顯異常。 結(jié)論:1.當將0.33%阿霉素20μl以坐骨神經(jīng)套管給藥時,大鼠各型背根節(jié)細胞均未發(fā)生顯著的退化性反應。2.光鏡和電鏡下的阿霉素所致大鼠各型背根節(jié)神經(jīng)元隨時間順序發(fā)生的變性、壞死結(jié)果與阿霉素作為可逆行軸漿傳輸?shù)纳窠?jīng)毒性因子的作用機制相適應,顯示有時間相關性。3.雖然光鏡下無法肉眼識別1.0%阿霉素20μl對大鼠DRG各型神經(jīng)元細胞影響的差別;但通過光鏡細胞計數(shù)和電鏡觀察結(jié)
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