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1、鄭碩士淪文題目:作者姓名:學科門類:專業(yè)名稱:導帥姓名、耿稱:授予單位代碼10459學號或申請?zhí)枺?!!!!!密級:州火學位攔芻淪一艾宮內感染和宮內室息對早產鼠腦損傷的聯(lián)合作用董慧芳醫(yī)學兒科學程秀永教授朱長連教授二零零五年五月2005年碩士研究生畢業(yè)論文宮內感染和宮內窒息對早產鼠腦損傷的聯(lián)合作用(摘要部分)娠第一天,提出單獨喂養(yǎng)。2通過預實驗確定宮內感染合并宮內窒息早產鼠腦損傷模型制作方法為LPS05mg/kg十宮內窒息15min。3宮
2、內感染合并宮內窒息動物模型的制作:妊娠18天的孕鼠腹腔注射LPS05mg/kg后4h,乙醚吸入麻醉,仰臥位固定于手術臺上,腹部剪毛后常規(guī)消毒,下腹部正中切口開腹,輕輕拉出子宮后置于溫紗墊上,無創(chuàng)血管夾鉗夾子宮動脈和胎盤分支血管15min。之后用溫生理鹽水濕潤的紗布覆蓋在子宮上,不時更換,以保持子宮的溫度和濕度。窒息時間滿足后,取下血管夾,將子宮送回腹腔,縫合腹部。切口消毒后用無菌紗布包扎。Ns假術組孕鼠腹腔注射1MNS后4h,僅手術分離
3、子宮動脈和胎盤分支血管,不結扎,15min后送回腹腔(方法同上)。NS窒息組動物腹腔注射ImlNS后4h,同上方法鉗夾子宮動脈和胎盤分支血管15min。4標本制備:各組試驗條件滿足后,剖腹取出胎鼠,麻醉后經(jīng)左心室灌注生理鹽水5ml,然后灌注10%多聚甲醛直至軀體蒼白變硬,取出腦組織,置lO%多聚甲醛溶液中固定72h以上。經(jīng)脫水、透明、浸蠟后石蝤包埋。切片以海馬部位為標志,片厚5啪。5切片處理:切片分別進行HE染色、TUNEL染色、6FA
4、P免疫組化、TNF—a免疫組化和tPA免疫組化(均為SABC法)。結果:1HE染色:LPS窒息組鼠腦細胞水腫程度、細胞層次紊亂程度較LPS組和窒息組為重,凋亡細胞數(shù)量較LPS組和窒息組多。并且,LPs窒息組有腦室背側角出血、腦室擴大以及腦室背側角壞死后囊性空洞現(xiàn)象,而窒息組無上述現(xiàn)象,LPS組僅有1例發(fā)生側腦室出血。2TUNEL和GFAP染色:兩者結果均為:陽性細胞數(shù)LPs窒息組:LPS組、窒息組NS假術組,LPS窒息組與LPS組、窒息
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