HMGB1及其受體RAGE在宮內(nèi)感染后早產(chǎn)兒腦損傷中的作用及臨床意義.pdf

1、目的:通過(guò)檢測(cè)臍血及胎盤(pán)高遷移率族蛋白B1(high mobility group protein1，HMGB1)和晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(receptor for advanced glycation endproducts，RAGE)水平變化，同時(shí)分析比較胎盤(pán)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)與早產(chǎn)兒腦損傷(Brain injury in preterm infants，BIPI)的關(guān)系，探討HMGB1和RAGE在宮內(nèi)感染(intrauterine in

2、fections，IUI)后BIPI發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法:選取2012年9月-2014年1月江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院產(chǎn)科出生隨后轉(zhuǎn)入新生兒重癥監(jiān)護(hù)病房(NICU)胎齡在30-32周間早產(chǎn)兒為研究對(duì)象。所有早產(chǎn)兒娩出后立即斷臍，抽取臍靜脈血，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)檢測(cè)臍血中HMGB1和可溶性晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(soluble receptor fo

3、r advancedglycation endproducts，sRAGE)的水平。采用HE染色觀察胎盤(pán)組織病理學(xué)改變并在光學(xué)顯微鏡下對(duì)浸潤(rùn)的中性粒細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù);采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)HMGB1和RAGE在胎盤(pán)組織中的表達(dá)情況。根據(jù)頭顱B超或者頭顱核磁共振(magnetic resonance imaging，MRI)檢查結(jié)果進(jìn)行BIPI的診斷及分度，分為無(wú)腦損傷組（對(duì)照組）、輕度腦損傷及重度腦損傷組;以胎盤(pán)病理組織學(xué)診斷絨毛膜羊膜炎為

4、宮內(nèi)感染診斷標(biāo)準(zhǔn)，將腦損傷早產(chǎn)兒進(jìn)一步分為宮內(nèi)感染腦損傷組和無(wú)宮內(nèi)感染腦損傷組，并以無(wú)宮內(nèi)感染且無(wú)腦損傷的早產(chǎn)兒作為對(duì)照進(jìn)行研究。
　　結(jié)果:1.早產(chǎn)兒一般資料比較:納入早產(chǎn)兒共108例，對(duì)照組67例，輕度腦損傷組33例，重度腦損傷組8例。三組早產(chǎn)兒胎齡、出生體重、性別、出生方式、圍產(chǎn)期使用激素、肺表面活性物質(zhì)及機(jī)械通氣等方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.不同程度腦損傷早產(chǎn)兒臍血中HMGB1、sRAGE水平:對(duì)

5、照組早產(chǎn)兒臍血中HMGB1水平明顯低于兩個(gè)腦損傷組，輕度腦損傷組HMGB1水平低于重度腦損傷組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）。對(duì)照組早產(chǎn)兒臍血中sRAGE水平明顯高于兩個(gè)腦損傷組，輕度腦損傷組sRAGE水平高于重度腦損傷組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.01)。
　　3.臍血HMGB1、sRAGE與宮內(nèi)感染后早產(chǎn)兒腦損傷關(guān)系:宮內(nèi)感染腦損傷組31例，無(wú)宮內(nèi)感染腦損傷組10例，對(duì)照組(無(wú)宮內(nèi)感染且無(wú)腦損傷)45例。宮內(nèi)感染腦

6、損傷組早產(chǎn)兒臍血中HMGB1水平高于無(wú)宮內(nèi)感染腦損傷組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），無(wú)宮內(nèi)感染腦損傷組和對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。sRAGE水平在宮內(nèi)感染腦損傷組低于無(wú)宮內(nèi)感染腦損傷組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，無(wú)宮內(nèi)感染腦損傷組和對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　4.HE染色胎盤(pán)組織病理學(xué)檢查:重度腦損傷組早產(chǎn)兒發(fā)生絨毛膜羊膜炎7例，絨毛膜羊膜炎發(fā)生率87.5％;輕度腦損傷

7、組絨毛膜羊膜炎24例，發(fā)生率72.7％;對(duì)照組22例，發(fā)生率32.8％，絨毛膜羊膜炎發(fā)生率重度腦損傷組與輕度腦損傷組較對(duì)照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，重度腦損傷組與輕度腦損傷組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。光鏡下對(duì)浸潤(rùn)的中性粒細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，對(duì)照組早產(chǎn)兒胎盤(pán)中每高倍鏡下中性粒細(xì)胞數(shù)明顯低于兩個(gè)腦損傷組，輕度腦損傷組低于重度腦損傷組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）。
　　5.胎盤(pán)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)程度與臍血

8、HMGB1、sRAGE水平相關(guān)性:臍血中HMGB1水平與胎盤(pán)組織中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)呈正性相關(guān)(r=0.579，P＜0.001);而臍血中sRAGE水平與胎盤(pán)組織中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)呈負(fù)性相關(guān)（r=-0.415，P＜0.001）。
　　6.受試者工作特征曲線(Receiver operating characteristic curve，ROC)評(píng)價(jià)臍血中HMGB1、sRAGE水平在診斷BIPI中的價(jià)值:在診斷BIPI時(shí)，HMGB1線下面

9、積(areaunder the curve，AUC)為0.675，95％可信區(qū)間(95％confidence interval，95％CI)為(0.561，0.789)，截?cái)帱c(diǎn)為185.52μg/L，特異度95.5％，敏感度46.3％;sRAGE線下面積AUC為0.668，95％CI為(0.563，0.773)，截?cái)帱c(diǎn)為192.80 pg/mL，特異度77.6％，敏感度53.7％。
　　7.胎盤(pán)組織中HMGB1及RAGE蛋白表達(dá):

10、對(duì)照組早產(chǎn)兒胎盤(pán)組織中可見(jiàn)少量HMGB1和RAGE蛋白表達(dá)，主要分布于滋養(yǎng)層細(xì)胞，亦可見(jiàn)于血管內(nèi)皮細(xì)胞和絨毛間質(zhì)細(xì)胞，呈略高于背景的淡黃色染色。輕度腦損傷組兩種蛋白表達(dá)分布與對(duì)照組一致，但陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞明顯增多，且染色強(qiáng)度增強(qiáng)，呈棕色染色，另可見(jiàn)少量深棕色染色的炎癥細(xì)胞分布其中。重度腦損傷組染色強(qiáng)度進(jìn)一步增強(qiáng)，呈現(xiàn)出深棕色染色，且有大量陽(yáng)性染色的炎癥細(xì)胞分布其中。對(duì)兩種蛋白表達(dá)強(qiáng)度進(jìn)行分析:兩腦損傷組胎盤(pán)組織HMGB1和RAGE蛋白表達(dá)強(qiáng)

11、度均高于對(duì)照組，重度腦損傷組高于輕度腦損傷組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。
　　結(jié)論:1.腦損傷早產(chǎn)兒臍血中細(xì)胞因子HMGB1水平明顯升高，且胎盤(pán)組織中HMGB1及RAGE表達(dá)均明顯增強(qiáng)，提示HMGB1/RAGE可能參與了BIPI的發(fā)生發(fā)展，且其變化程度與腦損傷的嚴(yán)重程度具有一定的相關(guān)性。
　　2.腦損傷早產(chǎn)兒臍血中sRAGE水平明顯下降，其水平的變化程度與病變程度呈負(fù)性相關(guān)，提示sRAGE對(duì)早產(chǎn)兒腦可能具有保護(hù)性