臍血HIF-1a、VEGF測定及其早產(chǎn)兒腦損傷關系的臨床研究.pdf

1、目的:早產(chǎn)兒腦損傷(brain injury in premature infants)是早產(chǎn)兒常見并發(fā)癥，幸存者常遺留嚴重的神經(jīng)發(fā)育障礙，如認知缺陷和運動障礙等，隨著早產(chǎn)兒存活率的增加，腦損傷的發(fā)病率也隨之增加，如何早期診斷早產(chǎn)兒腦損傷及減少其引起的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥有著重要的意義。早產(chǎn)兒腦損傷的常見原因包括圍產(chǎn)期缺氧缺血和宮內(nèi)感染及炎癥反應，最常見的是圍產(chǎn)期缺氧缺血。目前診斷主要依靠臨床表現(xiàn)及影像學檢查如超聲、磁共振成像(MRI)等，尚

2、缺乏客觀的反映病情的生化診斷指標。臍血清低氧誘導因子-1a(Hypoxia inducible factor-1a，HIF-1a)是一種機體缺氧應答的全局性調(diào)控因子，廣泛參與哺乳動物細胞中缺氧誘導的特異應答反應，在缺氧誘導的基因表達調(diào)解中起關鍵作用。HIF-1a在大鼠腦組織缺氧缺血1小時內(nèi)表達增加，48-72小時達高峰，其下級級聯(lián)因子血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是促

3、進新生血管形成的重要調(diào)節(jié)者，這些靶基因的激活對缺氧組織具有保護作用。動物實驗證實新生大鼠腦組織缺氧缺血可使VEGF蛋白在6～24小時內(nèi)顯著上調(diào)，VEGF具有擴大管腔，形成小血管的作用。本研究通過檢測104例伴圍產(chǎn)期缺氧相關高危因素的早產(chǎn)兒的臍血PH值及HIF-1a、VEGF的含量，探討：
　　 ①圍產(chǎn)期缺氧相關高危因素與早產(chǎn)兒腦損傷的關系。
　　 ②臍血PH值與早產(chǎn)兒窒息、腦損傷的關系。
　　 ③臍血清HIF-1

4、a、VEGF水平變化與腦損傷的發(fā)生及程度的關系，進一步闡述HIF-1a在早產(chǎn)兒腦損傷發(fā)病中的可能機制，及HIF-1a、VEGF在早產(chǎn)兒腦損傷中的協(xié)同作用和VEGF對受損中樞神經(jīng)系統(tǒng)的保護機制，為臨床診斷及治療提供相關的實驗依據(jù)。
　　 方法:選擇河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院產(chǎn)科2012年3月-2012年12月出生的有圍生期缺氧相關高危因素的早產(chǎn)兒104例，圍生期缺氧相關高危因素包括妊娠高血壓綜合征、產(chǎn)婦貧血、胎盤異常、臍帶異常、宮內(nèi)窘迫

5、。根據(jù)臨床表現(xiàn)及超聲檢查進行早產(chǎn)兒腦損傷的診斷及分度:無腦損傷組70例，腦損傷組34例，其中輕度腦損傷組23例、中重度腦損傷組11例;并記錄入選早產(chǎn)兒性別、胎齡、體重等結合相關臨床資料對比分析。在新生兒娩出且尚未建立自主呼吸時立即用肝素抗凝的注射器抽取采臍動脈血1mL行血氣分析，并記錄1min內(nèi)Apgar評分。另外取受檢者臍動脈血3ml離心后(4℃，3000r/min，15min)，提取血清(1ml)置-80℃冰箱內(nèi)貯存待測;采用酶聯(lián)免

6、疫吸附法檢測臍血清HIF-1a、VEGF的水平。實驗數(shù)據(jù)用SPSS16.0軟件進行統(tǒng)計學分析，計量資料采用均數(shù)±標準差((x)±s)表示;多組間比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)，兩兩比較采用最小顯著差法(least significant difference，LSD)法，方差不齊的計量資料各組均數(shù)的比較采用Dunnett's法;計數(shù)資料采用卡方檢驗。統(tǒng)計學處理取雙側檢驗，檢驗水平α=0.05，P＜0.05者視為差異

7、有統(tǒng)計學意義。
　　 結果:
　　 1、圍產(chǎn)缺氧相關危險因素與早產(chǎn)兒腦損傷的關系
　　 早產(chǎn)兒腦損傷的圍產(chǎn)期缺氧相關高危因素分析結果示，母親妊娠高血壓綜合征、胎兒宮內(nèi)窘迫腦損傷的發(fā)生率明顯增高，與無腦損傷組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）;而臍帶異常、胎盤異常、產(chǎn)婦貧血腦損傷發(fā)生率與無腦損傷組比較無明顯差異，經(jīng)統(tǒng)計學分析，無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 2、胎齡及出生體重與早產(chǎn)兒腦損傷的關系

8、r>　　 2.1、腦損傷在早期早產(chǎn)兒組及晚期早產(chǎn)兒組的發(fā)生率結果示，早期早產(chǎn)兒組腦損傷發(fā)生率(40.98％)明顯增高，且顯著高于晚期早產(chǎn)兒組(20.93％)，經(jīng)卡方檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）
　　 2.2、不同出生體重早產(chǎn)兒腦損傷的發(fā)生率，極低出生體重兒組腦損傷發(fā)生率(40.68％)明顯增高，且顯著高于低出生體重兒組(18.46％)，經(jīng)卡方檢驗，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 3、臍血PH值與早產(chǎn)

9、兒窒息、腦損傷的關系
　　 臍血PH與早產(chǎn)兒窒息、腦損傷的關系結果示，與無窒息組(7.30±0.04)相比，窒息組的臍血PH值（7.13±0.03）明顯降低，與無腦損傷組（7.30±0.05）相比，腦損傷組的臍血PH值（7.05±0.06）明顯降低，經(jīng)t檢驗分析，差異顯著，均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 4、臍血HIF-1a、VEGF與早產(chǎn)兒腦損傷及其分度的關系
　　 腦損傷組臍血HIF-1a（54.25

10、±19.15）、VEGF（201.63±31.86）較無腦損傷組明顯增高，經(jīng)t檢驗，差異顯著，(P＜0.05);且隨著腦損傷程度的加重HIF-1a水平進一步增高，其中在輕度腦損傷組（42.96±9.57）及中重度腦損傷組（77.85±10.13），HIF-1a水平均顯著高于無腦損傷組(P＜0.05);中重度腦損傷組HIF-1a的表達明顯高于輕度腦損傷組(P＜0.05);而隨著腦損傷程度的加重VEGF水平明顯降低，中重度腦損傷組VEGF（

11、167.95±8.74）的表達明顯低于輕度腦損傷組（217.73±25.49）(P＜0.05)。
　　 5、臍血PH值及血清HIF-1a、VEGF在早產(chǎn)兒腦損傷病情評價中的比較
　　 應用ROC(Receiver operating characteristic curve，ROC)曲線比較早產(chǎn)兒腦損傷組臍血PH值及血清HIF-1a、VEGF水平變化的敏感度及特異度。
　　 早產(chǎn)兒腦損傷組ROC曲線下面積比較:P

12、H＞HIF-1a＞VEGF;
　　 靈敏度比較:VEGF＞HIF-1a＞PH;
　　 特異度比較:PH＞ HIF-1a＞VEGF。
　　 結論:
　　 1、母親妊娠高血壓綜合征、胎兒宮內(nèi)窘迫腦損傷的發(fā)生率明顯高于無腦損傷組，提示母親妊娠高血壓綜合征、胎兒宮內(nèi)窘迫是早產(chǎn)兒腦損傷的絕對高危因素，可能與早產(chǎn)兒腦損傷密切相關。
　　 2、臍血PH值在早產(chǎn)兒腦損傷組中顯著降低，提示臍血PH值可作為協(xié)助診斷早

13、產(chǎn)兒腦損傷的指標。
　　 3、早產(chǎn)兒腦損傷組HIF-1a水平明顯高于無腦損傷組，且變化程度與腦損傷損傷程度一致，中重度腦損傷患兒HIF-1a水平顯著高于輕度組，提示HIF-1a水平測定對于預測早產(chǎn)兒腦損傷，判斷腦損傷程度及估計預后具有一定價值。
　　 4、VEGF水平在早產(chǎn)兒腦損傷組患兒中顯著升高，其變化程度與腦損傷損傷程度不一致，中重度腦損傷患兒VEGF水平低于輕度腦損傷組，提示VEGF可能參與了早產(chǎn)兒腦損傷的修復，可