褪黑素對(duì)細(xì)菌脂多糖導(dǎo)致的胎鼠宮內(nèi)感染腦損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過給孕鼠腹腔注射細(xì)菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）建立大鼠宮內(nèi)感染模型，研究褪黑素(melatonin，MT)對(duì)細(xì)菌脂多糖引起的胎鼠宮內(nèi)感染腦損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制，為深入研究MT在產(chǎn)科的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：選用妊娠第19天SD大鼠，隨機(jī)分組，空白對(duì)照組（S組）、宮內(nèi)感染組（LPS組）、MT處理組（MT組）。通過給孕鼠腹腔注射細(xì)菌脂多糖(LPS)造成宮內(nèi)感染動(dòng)物模型。LPS組和S組

2、分別予腹腔注射LPS(500μg/kg)和等容積生理鹽水；MT處理組孕鼠同時(shí)腹腔注射LPS500μg/kg＋MT10mg/kg。將各組孕鼠根據(jù)注藥后觀察時(shí)間不同，分為注藥后1h、6h、12h、24h、48h、72h六個(gè)時(shí)間點(diǎn)，各時(shí)間點(diǎn)4只孕鼠，于相應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)迅速處死孕鼠，冰盒上剖腹取胎并取出胎鼠腦及胎盤組織，分別測(cè)定腦組織勻漿GSH-Px含量，采用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)胎鼠腦組織中iNOSmRNA的水平表達(dá)情況，HE染色觀察胎盤及胎腦組織

3、病理變化，同時(shí)應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腦細(xì)胞凋亡蛋白Bax表達(dá)，并比較各組之間的差異。
　　 結(jié)果：
　　 1、成功構(gòu)建了宮內(nèi)感染胎鼠腦損傷模型，HE染色、光鏡下觀察，胎盤、胎腦均發(fā)現(xiàn)有炎癥表現(xiàn)，宮內(nèi)感染組胎盤組織見中性粒細(xì)胞浸潤，胎鼠腦皮質(zhì)染色淡，結(jié)構(gòu)疏松呈篩網(wǎng)狀改變，神經(jīng)纖維走向紊亂，粗細(xì)不均等。
　　 2、隨感染時(shí)間延長宮內(nèi)感染組與空白對(duì)照組比較，胎鼠腦組織中GSH-Px活力逐漸下降，72h達(dá)最低點(diǎn)；iNOS

4、mRNA含量則是先升后降，腦組織iNOSmRNA含量于1h開始上升，6h明顯上升，12h達(dá)最高，各時(shí)間段均明顯高于對(duì)照組(P＜0.001)；腦細(xì)胞凋亡蛋白Bax增多，6h較為明顯，于24h達(dá)高峰，之后逐漸下降，至72h仍高于對(duì)照組，同時(shí)隨著感染時(shí)間的延長，上述改變趨于明顯(P＜0.05)。
　　 3、MT能使宮內(nèi)感染胎鼠腦組織中GSH-Px含量明顯升高，iNOSmRNA水平顯著下降，減少腦細(xì)胞凋亡蛋白Bax的表達(dá)，且均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

5、義（P＜0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1、本實(shí)驗(yàn)證明給孕鼠腹腔注射脂多糖可導(dǎo)致胎鼠腦損傷，表明宮內(nèi)感染是導(dǎo)致胎鼠腦損傷的重要因素之一。
　　 2、宮內(nèi)感染致胎鼠腦組織脂質(zhì)過氧化、腦神經(jīng)損傷，同時(shí)一定時(shí)間內(nèi)，隨著感染時(shí)間的延長而逐漸加重。
　　 3、宮內(nèi)感染不僅引起腦細(xì)胞壞死，還可引起繼發(fā)性腦細(xì)胞凋亡，宮內(nèi)感染誘導(dǎo)腦細(xì)胞凋亡與凋亡蛋白Bax增多有關(guān)。
　　 4、褪黑素對(duì)宮內(nèi)感染胎鼠腦組織氧化損傷