排鉛聚糖對鉛染毒小鼠的治療作用機理及其毒理學研究.pdf

1、【目的】 鉛是構成地殼的元素之一，在地球上分布廣泛，普遍存在于空氣、土壤、和水體中。由于鉛及其化合物在工業(yè)和生活中的應用較為廣泛，人們接觸鉛的機會也大大增加。研究表明，鉛可通過被污染的飲水、空氣、食物和吸煙等進入人體，一部分可在人體內(nèi)蓄積并產(chǎn)生慢性毒性。鉛毒性作用的主要危害是干擾造血系統(tǒng)血紅素的合成，使血紅蛋白降低，出現(xiàn)貧血；可使中樞神經(jīng)系統(tǒng)與周圍神經(jīng)系統(tǒng)受損，引起中毒性腦病和周圍神經(jīng)病；對消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、生殖

2、系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)都可產(chǎn)生危害，干擾鈣磷的代謝。目前對于鉛中毒疾病的治療方法很多。其中排鉛保健食品是一種對人體毒副作用小，排鉛效果顯著的重要方法。本實驗把排鉛聚糖作為一種新型排鉛保健食品進行小鼠動物實驗，主要從排鉛聚糖對鉛染毒小鼠的治療保護作用及其毒理學方面進行研究，為尋求一種安全有效的預防治療鉛中毒的方法提供理論依據(jù)。 【方法】 1．排鉛聚糖的最大耐受劑量(MTD)實驗取20g左右的健康昆明種小鼠14只，雌雄各

3、半，按小鼠最大灌胃容量0.4ml/10g劑量，給予排鉛聚糖最大混懸濃度60mg/ml灌胃1次，觀察1周，記錄體重變化及死亡情況。 2．排鉛聚糖的遺傳毒理學實驗取18～22g健康昆明種小鼠30只，雌雄各半，按體重隨機分為5個劑量組：環(huán)磷酰胺陽性對照組，生理鹽水陰性對照組，排鉛聚糖高、中、低劑量組。于第4次染毒后24h進行外周血和骨髓微核實驗，并取腦、肝、腎觀察其大體解剖學改變并稱重。 3．排鉛聚糖的生殖毒理學試驗取30～3

4、5g健康昆明種雄性小鼠30只，按體重隨機分為5組：環(huán)磷酰胺陽性對照組，生理鹽水陰性對照組，排鉛聚糖高、中、低劑量組。于第1次染毒后35d進行精子畸變實驗，在光鏡下觀察精子形態(tài)改變，計算精子畸變率。并取腦、肝、腎觀察其大體解剖學改變并稱重。 4．排鉛聚糖對鉛中毒小鼠的排鉛實驗取18～22g健康昆明種小鼠50只，雌雄各半，按體重隨機分成5組：生理鹽水陰性對照組，排鉛聚糖低、中、高劑量組，醋酸鉛模型對照組。醋酸鉛模型對照組及低、中、

5、高劑量組用醋酸鉛注射造成鉛中毒模型后，各劑量組灌胃給予排鉛聚糖，陰性對照組和模型對照組給予生理鹽水。實驗結束后取血并處死小鼠，取肝、腎、股骨、腦，經(jīng)消化后用原子吸收分光光度計測定鉛的含量。 5．排鉛聚糖對鉛中毒小鼠血液、肝、腦、腎、骨中其他必需金屬元素的影響取18～22g健康昆明種小鼠50只，雌雄各半，分組及處理同4．排鉛聚糖對鉛中毒小鼠的排鉛實驗。實驗結束后取血并處死小鼠，取肝、腎、股骨、腦，經(jīng)消化后用原子吸收分光光度計測定鈣

6、、鎂、鐵、鋅、銅、錳的含量。 6．排鉛聚糖對鉛遺傳毒性的拮抗作用 6．1各組小鼠的外周血和骨髓微核實驗取18～22g健康昆明種小鼠120只，雌雄各半，根據(jù)體重隨機分為6組：環(huán)磷酰胺陽性對照組，生理鹽水陰性對照組，醋酸鉛對照組，排鉛聚糖低、中、高劑量組，分別于第2次及第4次染毒后48h處死進行外周血和骨髓微核實驗。 6．2排鉛聚糖對急性鉛染毒小鼠肝、腦、腎中排鉛作用取18～22g健康昆明種近交小鼠60只，雌雄各半，

7、分組與處理同6.1各組小鼠的外周血和骨髓微核實驗。第4次染毒后48h處死小鼠，取其腦、肝、腎，消化后測其中鉛的含量，以觀察排鉛聚糖對急性鉛染毒的排出情況。 6．3排鉛聚糖對急性鉛染毒小鼠肝、腦、腎中鈣、鎂、鐵、鋅、銅等必需金屬元素的影響取18～22g健康昆明種近交小鼠60只，雌雄各半，分組與處理同6.1各組小鼠的外周血和骨髓微核實驗。第4次染毒后48h處死小鼠，取其腦、肝、腎，消化后測其中鈣、鎂、鐵、鋅、銅等元素的含量，以觀察排

8、鉛聚糖對急性鉛染毒小鼠的必需金屬元素的影響。 7．排鉛聚糖對染鉛小鼠生殖損傷的恢復作用取30～35g健康昆明種近交雄性小鼠49只，根據(jù)體重隨機分為7組：環(huán)磷酰胺陽性對照組，生理鹽水陰性對照組，醋酸鉛對照組，排鉛聚糖高、中、低劑量組，排鉛聚糖的中劑量預防組。于第1次染毒后35d處死進行精子畸變實驗。在光鏡下觀察精子形態(tài)改變，計算精子畸變率。 8．排鉛聚糖對鉛抑制抗氧化酶系活性的恢復作用取18～22g健康昆明種近交小鼠36只

9、，雌雄各半。按體重隨機分為6組：醋酸鉛模型組，生理鹽水陰性對照組，排鉛聚糖低、中、高劑量組，排鉛聚糖中劑量預防組。鉛模型組及排鉛聚糖各劑量組先進行鉛染毒造成鉛中毒模型，后排鉛聚糖低、中、高劑量組給予不同劑量排鉛聚糖，預防組則在染毒同時給予中劑量排鉛聚糖。給藥結束后分別取肝、腦、腎測谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)抗氧化酶活性及丙二醛(MDA)含量。 同時取各組小鼠腦、肝、腎做病理切片，光鏡下觀察各臟器

10、的病理改變情況。 9．排鉛聚糖對鉛所致肝、腎功能損傷的恢復作用取18～22g健康昆明種近交小鼠36只，雌雄各半。分組及處理情況同8．排鉛聚糖對鉛抑制抗氧化酶系活性的恢復作用。給藥結束后取血清測總蛋白及白蛋白含量、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活力、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活力、堿性磷酸酶(ALP)活力；測血尿素氮(BUN)、尿酸(UA)含量，觀察排鉛聚糖對鉛中毒小鼠的肝功、腎功影響。 [結論] 排鉛聚糖的最大混懸濃度在最大灌胃