口服天然黃體酮給藥系統(tǒng)的設(shè)計(jì).pdf

1、黃體酮屬天然孕激素類藥，口服后易在胃、腸、肝等多個(gè)組織代謝，首過效應(yīng)強(qiáng)、口服生物利用度低且個(gè)體差異大，臨床常用注射給藥。但黃體酮大多需長期用藥，注射給藥給患者帶來了一定困難，脂質(zhì)體由于磷脂雙分子層形成的囊泡結(jié)構(gòu)，口服后可有效地保護(hù)藥物不被酶解，提高藥物體內(nèi)外穩(wěn)定性，促進(jìn)藥物吸收，提高藥物生物利用度。本文將孕激素類藥物天然黃體酮制成前體脂質(zhì)體，期望利用脂質(zhì)體的特點(diǎn)，促進(jìn)黃體酮吸收，避免體內(nèi)代謝，提高生物利用度，從而為黃體酮口服制劑的開發(fā)奠

2、定理論基礎(chǔ)。 本文利用新型前體脂質(zhì)體制備方法制備了黃體酮前體脂質(zhì)體，對黃體酮前體脂質(zhì)體的處方設(shè)計(jì)、理化性質(zhì)、胃腸液中的生物穩(wěn)定性、急性毒性、體外吸收、體內(nèi)過程及首過效應(yīng)進(jìn)行了全面深入的研究，黃體酮前體脂質(zhì)體的研究未見國內(nèi)報(bào)道。 在黃體酮前體脂質(zhì)體的處方優(yōu)選中，采用單因素考察和三元相圖優(yōu)選處方。在此基礎(chǔ)上對藥脂比進(jìn)行優(yōu)選，最終確定前體脂質(zhì)體處方。通過急性毒性試驗(yàn)考察了黃體酮前體脂質(zhì)體的急性毒性，結(jié)果黃體酮前體脂質(zhì)體毒性較小

3、，半數(shù)致死量小于市售微粉化黃體酮膠丸。通過影響因素實(shí)驗(yàn)和加速實(shí)驗(yàn)，證明黃體酮前體脂質(zhì)體對光及溫度均敏感，前體脂質(zhì)體宜在陰涼干燥處保存。通過HPLC法測定黃體酮前體脂質(zhì)體的含量。通過透射電鏡和掃描電鏡兩種方法觀察脂質(zhì)體的形態(tài)，并對空白脂質(zhì)體和含藥脂質(zhì)體的形態(tài)進(jìn)行比較，確定了脂質(zhì)體為多層脂質(zhì)體的形態(tài)。通過黃體酮脂質(zhì)體粒徑、電位值測定，證實(shí)黃體酮脂質(zhì)體粒徑為103.7nm、粒度分布較窄，脂質(zhì)體荷負(fù)電，ζ電位為-88.9mv。通過葡聚糖凝膠柱層

4、析法測定脂質(zhì)體的包封率，結(jié)果脂質(zhì)體的包封率達(dá)54.95±9.98％。通過影響包封率的因素考察，表明藥脂比、稀釋倍數(shù)均影響脂質(zhì)體的包封率。通過對前體脂質(zhì)體在室溫及4℃的滲漏率進(jìn)行考察，發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體在4℃下較穩(wěn)定。通過對脂質(zhì)體在人工胃液、人工腸液及大鼠胃內(nèi)容物、不同腸段內(nèi)容物中的穩(wěn)定性考察，結(jié)果證實(shí)脂質(zhì)體在人工胃腸液及大鼠胃內(nèi)容物中，保護(hù)作用不強(qiáng)，而在大鼠十二指腸、結(jié)腸內(nèi)容物中保護(hù)作用較強(qiáng)，表明脂質(zhì)體在體內(nèi)能保護(hù)黃體酮避免被腸道降解。

5、 在此基礎(chǔ)上，建立了Caco-2細(xì)胞模型，從細(xì)胞水平初步研究了黃體酮及黃體酮脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)運(yùn)及轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，結(jié)果表明黃體酮屬生物藥劑學(xué)分類系統(tǒng)中的Ⅱ類藥物，黃體酮的吸收和分泌過程均受到某種載體蛋白的介導(dǎo)，為主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)方式，表觀滲透系數(shù)Papp(BL-AP)>Papp(AP-BL)，P-gp抑制劑的存在會(huì)增加吸收，提示P-糖蛋白存在。P-糖蛋白又稱“藥泵”，它可能量依賴性的將細(xì)胞內(nèi)藥物泵出到細(xì)胞外，抑制P-糖蛋白的表達(dá)可能增加藥物吸收。而黃體酮脂質(zhì)

6、體可通過改變黃體酮轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，促進(jìn)黃體酮跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，打開細(xì)胞緊密連接、通過胞間轉(zhuǎn)運(yùn)，從而有效提高黃體酮的吸收，MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明黃體酮脂質(zhì)體在1:250倍稀釋時(shí)對細(xì)胞毒性較小。大鼠灌胃黃體酮脂質(zhì)體，研究了黃體酮脂質(zhì)體的體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)并與市售微粉化黃體酮膠丸作一對比，計(jì)算相對生物利用度。采用靈敏度高且臨床常用的放射免疫分析方法測定體內(nèi)黃體酮含量，采用口服交叉給藥避免黃體酮口服的個(gè)體差異，采用摘除大鼠卵巢避免內(nèi)源性黃體酮的干擾，采用頸靜脈插管術(shù)

7、進(jìn)行血樣收集。結(jié)果黃體酮脂質(zhì)體體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)行為符合二室模型，與對照組相比，AUC值有顯著性差異，生物利用度明顯增加，相對生物利用度為289.19％。 采用三種不同給藥途徑給藥，測定黃體酮脂質(zhì)體的首過效應(yīng)，結(jié)果黃體酮脂質(zhì)體在實(shí)驗(yàn)條件下，約49.49％的黃體酮于首過肝臟時(shí)被代謝，約26.00％的黃體酮被胃腸道代謝；靜脈給藥后黃體酮脂質(zhì)體較對照組有更大的生物利用度，體內(nèi)清除率降低。因此認(rèn)為黃體酮制成脂質(zhì)體后能有效促進(jìn)黃體酮吸收，延長黃體

8、酮在體內(nèi)的駐留時(shí)間，提高黃體酮的生物利用度。 為了更有效地避免黃體酮在體內(nèi)的代謝，進(jìn)一步提高黃體酮的生物利用度。本文嘗試對黃體酮脂質(zhì)體用殼聚糖進(jìn)行表面修飾，并測定了修飾脂質(zhì)體的理化性質(zhì)。結(jié)果脂質(zhì)體經(jīng)修飾后，包封率有所降低，脂質(zhì)體荷正電，修飾脂質(zhì)體在大鼠胃液中穩(wěn)定性明顯提高，生物利用度明顯增加，初步證明本法形成的黃體酮脂質(zhì)體表面修飾的可行性。 本文對黃體酮前體脂質(zhì)體的體內(nèi)外性質(zhì)進(jìn)行了一系列研究，對本法形成的脂質(zhì)體的吸收機(jī)理