CD44在前列腺癌細胞遷移、增殖中作用的分子生物學基礎的研究.pdf

1、目的:前列腺癌在歐美國家是最常見的男性惡性腫瘤,隨著人口老齡化及飲食結構的改變,中國前列腺癌的發(fā)病率和死亡率呈迅速增長的趨勢.前列腺癌的發(fā)病是與種族、環(huán)境因素相關的多基因異常和動態(tài)演進的結果.前列腺癌骨轉移是預后不良的標志,因此對腫瘤局部浸潤和遠隔轉移的分子機理研究正在成為腫瘤生物學研究的熱點.方法:該研究采用多種分子生物學方法對CD44在前列腺癌細胞遷移、增殖中作用進行了基本的探討.其中包括:1.使用不同的presenilin抑制劑觀

2、察其對前列腺癌PC-3細胞遷移和增殖表型的不同影響.2.觀察過量表達包含不同結構域的CD44分子對前列腺癌PC-3細胞遷移和增殖表型的不同影響.3.通過細胞組分分析和共聚焦顯微鏡直接觀察的方法研究CD44-ICD釋放后的亞細胞結構定位.4.通過對常見轉錄因子報告基因和信號傳導通路的檢測,研究釋放并轉移進核后的CD44-ICD,可能的基因調控通路.5.通過RNA干涉和反義RNA技術消除CD44基因在前列腺癌PC-3細胞中的表達,進而考察下

3、調CD44表達對腫瘤惡性表型的逆轉.另外,上述實驗中使用明膠酶譜分析、"劃痕"法和Matrigel包被的Transwell法等檢測PC-3細胞的遷移表型;使用MTT法檢測細胞存活和生長,Tunel法檢測細胞的凋亡.結論:該研究表明:在PC-3細胞中CD44分子分別受MT1-MMP和Presenilin1/2的作用,最終導致CD44ICD從膜結合型CD44△E的水解釋放并轉移進核,并可能通過調控NF-κB等轉錄因子,影響腫瘤細胞的惡性表型