野生型p14ARF基因?qū)θ朔伟┘?xì)胞增殖及放射敏感性影響的實驗研究.pdf

1、上海醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文野生型p14ARF基因?qū)θ朔伟┘?xì)胞增殖及放射敏感性影響的實驗研究姓名：高楠申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：放射腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：曹世龍20000501基于以下存在的問題：(1)INK4a基因是肺癌的常見失活靶點，而P14ARF蛋白在肺癌組織中的表達(dá)狀態(tài)不詳；(2)p14ARF與肺癌細(xì)胞增殖是否相關(guān)，它是否是肺癌的又一抑制基因；(3)p14ARF能否通過對細(xì)胞周期和對p53蛋白的調(diào)控而影響細(xì)胞的放射敏感性因為后兩者與放射敏感

2、性的關(guān)系確切。本課題希望探討p14ARF蛋白在肺癌組織標(biāo)本中的表達(dá)情況及相關(guān)意義；外源性野生型P14ARF基因的引入對不同基因背景肺癌細(xì)胞體內(nèi)外增殖和細(xì)胞周期的影響；外源性野生型p14ARF基因轉(zhuǎn)染對細(xì)胞放射敏感性的影響以及可能的原因和機制。第一部分p14ARF蛋白在人肺癌組織中的表達(dá)及意義摘要P14ARF是最近確定的一個細(xì)胞周期調(diào)控因子，它的基因結(jié)構(gòu)上和多腫瘤抑制基因MTSl(P16INK4a)緊密相連，其蛋白功能又與p53抑癌蛋白，

3、g息相關(guān)。一些腫瘤，如急性淋巴細(xì)胞白血病、星型膠質(zhì)細(xì)胞瘤、食管癌、黑色素瘤及多形性神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤等，常有INK4aARF位點的缺失及突變。在人肺癌中P16基因發(fā)生多機制失活，如點突變、小片段缺失、純合缺失、插入及啟動子區(qū)甲基化等，已得到大量報道，但是對p14ARF基因的狀態(tài)卻幾乎沒有探討。為了明確p14ARF蛋白在人肺癌中是否與p16發(fā)生共缺失還是獨立缺失，以及其表達(dá)狀況和臨床意義怎樣，我們選擇了54例非小細(xì)胞肺癌手術(shù)切除標(biāo)本，用免疫

4、組織化學(xué)的方法檢測了p14ARF、p16及p53蛋白的表達(dá)狀況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)NSCLC中P14ARF蛋白缺失率為407％(22／54)，p16蛋白缺失率為574％(31／54)，兩者的共缺失率為352％(19／54)；臨床IIIIV期組，P14ARF缺失率為60O％，淋巴結(jié)累及組，P14ARF缺失率為424％；p53蛋白陽性的28例中有14例(50％)p14ARF蚤白缺失。統(tǒng)計學(xué)分析表明，p14ARF蛋白缺失與病人的臨床分期、淋巴結(jié)累及與否