葡萄糖濃度波動對小鼠肝臟及人肝L02細胞影響的初步研究.pdf

1、隨著人民生活水平的提高，糖尿病已成為一種常見病、多發(fā)病，其引起的死亡人數(shù)僅位列心腦血管病與癌癥之后，已引起各國高度重視，紛紛對其發(fā)病機制、藥物防治投入巨資進行研究。高血糖是糖尿病的標志以及導致慢性并發(fā)癥的主要原因。臨床研究顯示，長期的血糖波動比慢性持續(xù)高血糖對于人體的危害更加嚴重。糖尿病人的預后及心血管、腎臟和視網(wǎng)膜病變等糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展不僅與整體血糖水平的升高密切相關，而且與血糖波動性也有密切關系。肝臟在人體消化、吸收、排

2、泄、生物轉(zhuǎn)化以及各類物質(zhì)代謝特別是糖代謝中起代謝中樞的作用，在糖尿病的發(fā)生發(fā)展中起著非常重要的作用，而血糖波動對小鼠肝臟以及人肝細胞影響的研究未見報道。因此本文從動物模型和離體細胞模型兩個層面來研究血糖波動對肝臟的損傷作用，旨在為進一步探討糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)病機理提供一些實驗依據(jù)，對臨床控制血糖的措施提供理論指導。 動物水平：以四氧嘧啶(alloxan)誘導糖尿病模型小鼠為實驗對象，用腹腔注射葡萄糖的方法建立糖尿病小鼠血糖波動

3、模型來觀察血糖波動和持續(xù)性高血糖對小鼠肝臟的不同損傷情況。實驗分為三組：正常組(N)、糖尿病模型組(M)和糖尿病模型+波動組(M+F)，四周后摘眼球取血處死小鼠，分別測定小鼠的血糖、血清轉(zhuǎn)氨酶活力、血清果糖胺含量，血清胰島素含量；肝臟勻漿中的糖原、谷胱甘肽(GSH)、過氧化氫酶(CAT)，丙二醛(MDA)和糖基化終產(chǎn)物(AGEs)等。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)糖尿病小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶活力升高，血清胰島素含量提高，胰島素敏感指數(shù)下降，AGEs含量提高，肝糖

4、原減少，GSH、CAT的含量下降，表明肝臟糖代謝、能量代謝出現(xiàn)紊亂，抗氧化能力的下降并且伴隨胰島素抵抗，而血糖波動組小鼠與糖尿病組小鼠相比對肝臟損傷更為嚴重。 細胞水平：以人肝L02細胞為實驗對象，以葡萄糖濃度波動和持續(xù)高糖及相關對照組分別處理細胞，來觀察葡萄糖濃度波動和持續(xù)高糖對人肝L02細胞的不同影響。將人肝L02細胞分成5組：正常對照組(N)、高糖損傷組(H)、葡萄糖濃度波動組(F)、總糖負載相同對照組(L)和滲透壓波動對

5、照組(P)。處理72h后分別測定培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)氨酶活力，細胞中糖原含量，MDA，GSH含量，ATP酶活力，葡萄糖激酶活性，游離鈣離子和細胞膜流動性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)葡萄糖濃度波動和高糖的條件下培養(yǎng)基中的轉(zhuǎn)氨酶活力明顯上升，胞內(nèi)游離鈣離子含量顯著上升，細胞膜流動性降低，葡萄糖激酶活性降低，且葡萄糖濃度波動組比持續(xù)高糖組對人肝L02細胞造成的損害總體上比較嚴重。上述實驗結(jié)果表明血糖波動對糖尿病小鼠肝臟和人肝L02細胞造成的損害均比持續(xù)的高糖濃度造成的損