不同地點(diǎn)間樺剝管菌的木材降解相關(guān)酶及TRAP和SRAP標(biāo)記的遺傳多樣性分析.pdf

1、樺剝管菌Q949.320.3作為一種重要的降解樺樹屬的真菌，在民間醫(yī)藥中一直被用作抗寄生蟲和抗菌劑用于傷口和直腸癌等疾病的治療。西方國家對(duì)樺剝管菌的研究已進(jìn)行多年，且研究力度逐年加大;而我國對(duì)樺剝管菌的研究起步較晚，目前的研究大多集中在藥理藥效及化學(xué)成分、降解木材機(jī)制等方面，人工栽培研究較少，遺傳多樣性和優(yōu)良品種選育方面更是空白，而其它藥用真菌如靈芝、蛹蟲草等早就培育出了很多新品種。
　　在木腐菌中，樺剝管菌作為一種褐腐真菌，在降

2、解白樺木材上起主要作用。這種真菌能在許多條件下緩慢地降解木材，并在脆弱的樹干和樹枝上引起褐腐病。到目前為止，對(duì)樺剝管菌的木材腐朽相關(guān)降解酶的研究才剛剛起步。因此本試驗(yàn)定量地測定不同地區(qū)樺剝管菌菌株不同天數(shù)下的半纖維素酶（木聚糖酶、α-葡萄糖苷酶、甘露聚糖酶）和纖維素降解相關(guān)酶（內(nèi)切纖維素酶、外切纖維素酶及β-葡聚糖苷酶），以期為樺剝管菌對(duì)木材降解機(jī)制的研究奠定基礎(chǔ)。不同天數(shù)的酶活測定結(jié)果表明在帽兒山和敦化所采集的菌種中，菌株產(chǎn)酶量相對(duì)較

3、高，方差分析結(jié)果表明不同菌株和天數(shù)之間酶活差異顯著。多維尺度分析和熱圖分析結(jié)果將來自4個(gè)采集地的15個(gè)菌株分成了2大類，且分類結(jié)果基本上符合地理距離相近相似的原則，這一聚類結(jié)果表明，不同采集地點(diǎn)的真菌在產(chǎn)酶能力水平上是有差異的，這為后續(xù)實(shí)驗(yàn)從分子水平上鑒定其差異奠定了基礎(chǔ)。
　　在世界各地，樺剝管菌子實(shí)體的外形非常相似，僅基于形態(tài)特征對(duì)其分類鑒定有一定的困難;TRAP和SRAP標(biāo)記是近幾年開發(fā)出來的新型分子標(biāo)記技術(shù)，操作簡單快速、

4、多態(tài)性高、重復(fù)性好、引物利用率高。因此，本試驗(yàn)利用TRAP和SRAP分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)采自不同地區(qū)樺剝管菌菌株進(jìn)行遺傳多樣性分析，為樺剝管菌新品種的選育和鑒定以及進(jìn)一步利用提供理論依據(jù)。結(jié)果表明SRAP標(biāo)記下的多態(tài)性條帶數(shù)為200（多態(tài)性條帶比率為95.24％），高于TRAP標(biāo)記下的多態(tài)性條帶數(shù)131(多態(tài)性條帶比率88.51％)，說明SRAP技術(shù)比TRAP能獲得更多的遺傳信息;各遺傳多樣性指數(shù)值在帶嶺地區(qū)中最高，在敦化地區(qū)最低，說明帶嶺的

5、菌株擁有相對(duì)較高的遺傳變異;各地點(diǎn)間菌株均擁有豐富的遺傳多樣性，且變異率主要來源于種群內(nèi)，這意味著樺剝管菌的遺傳分化主要發(fā)生在種群內(nèi)，這和群體間遺傳分化系數(shù)結(jié)果相一致。系統(tǒng)聚類結(jié)果和主坐標(biāo)分析進(jìn)一步明確了4個(gè)采集地的樺剝管菌遺傳親緣關(guān)系，即帶嶺和塔河的全部菌株聚為一組，敦化和帽兒山的全部菌株聚為一組，即地理距離上相近的個(gè)體和群體在遺傳關(guān)系上較為相似。同時(shí)，利用TRAP/SRAP數(shù)據(jù)構(gòu)建的遺傳相關(guān)聚類圖也能夠反映樺剝管菌菌株的地理來源關(guān)系