HIF-1為靶點(diǎn)的反義VEGF及TK基因治療骨肉瘤的體外研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文HIF1為靶點(diǎn)的反義VEGF及TK基因治療骨肉瘤的體外研究姓名：王燕申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：丘鉅世20040518旦墾1—塑墊燕啦』型曼塑廈—幽#盎鶯骨肉精的體外研究摘要因子釋放，且易產(chǎn)生對(duì)放療、化療的耐受性，由此增進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。缺氧誘導(dǎo)因子一1(hypoxiainduciblefactor1HIF—t)是缺氧條件下廣泛存在于哺乳動(dòng)物和人體細(xì)胞內(nèi)靜一釋孩轉(zhuǎn)錄因子，楚直接辯低氧锨出反應(yīng)

2、的關(guān)鍵蛋自倭。缺氧條件下，細(xì)胞核產(chǎn)生HIFl與靶基毽上的HIF—l結(jié)合位點(diǎn)(hypoxiareactionelement，HRE)結(jié)合，形成轉(zhuǎn)錄越始復(fù)合物從而啟動(dòng)和促進(jìn)靶基因的轉(zhuǎn)錄。HIF1的靶基因涉及腫瘤細(xì)胞的能量代謝、瓤生血管形成、以及促進(jìn)腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移等。基于HIF。l在腫瘤發(fā)展，演進(jìn)中的重要作用，以HIF1為靶點(diǎn)的靶向缺氧的腫瘤基因治療策略成為許多研究者的共識(shí)。由于HIF一1／HRE基因調(diào)節(jié)系統(tǒng)儀在祗氧情況下激活，麗實(shí)俸辯瘤又常

3、其有竣氧懿徽環(huán)境，霾詫可竣1爵l予作為靶囪褒達(dá)特異性治療基因鮑載傳?；谏鲜隼碚摶A(chǔ)，本課題設(shè)計(jì)的基本思路怒：以HIF一1／HRE基因調(diào)節(jié)系統(tǒng)為載體，嘗試尋找能夠靶向性抑制骨肉瘤血管生成，或者能夠特界性殺死腫瘤細(xì)胞的單基因或多基閡治療方案。本研究匏鑫翁是：褥反義VEGF，HSVTK分臻或建時(shí)連接劐臺(tái)有HIF一1特異結(jié)合彥YU(HRE)扇動(dòng)子的真核襲達(dá)載體上，分別轉(zhuǎn)染骨肉瘤細(xì)胞株，繪予外源性缺氧刺激，觀察其缺氧靶向性表達(dá)效果，及對(duì)腫瘤細(xì)胞

4、生長(zhǎng)抑制作用潑殺傷作用。旨在從抗血管生成和(或)自殺基因治療骨肉瘸方面進(jìn)行靶向性研究。本研究分為4章：第章瓣l玨在骨肉瘤中的表達(dá)及其葛盎警生成翱溪囂豹關(guān)系髫戇：檢測(cè)HIF，l氆在囂裹瘦中的表達(dá)馕援，探討其與缺氧馕況下置肉癟血管生戲秘預(yù)后的關(guān)系。方法：采用免瘕組織化學(xué)SP法檢測(cè)46例有完整隨訪資料的骨肉瘤病例中HIF—let、VEGF、CD34的表達(dá)。用Spearman分析備指標(biāo)間的相關(guān)性，并結(jié)合臨床資料進(jìn)行生存莛羹線分瓣?？p累；46例骨