當(dāng)歸和當(dāng)歸補(bǔ)血湯指紋圖譜及對(duì)兔血吸蟲病肝纖維化的藥理藥效研究.pdf

1、中藥色譜指紋圖譜是中藥(包括中藥單味藥與中藥復(fù)方制劑)整體性的化學(xué)表征。指紋圖譜質(zhì)量控制模式的提出使得中藥(材)的研究方法和質(zhì)量分析手段也由針對(duì)一個(gè)或者少數(shù)幾個(gè)活性成分(指標(biāo)成分)的分析，發(fā)展成為對(duì)整味中藥化學(xué)成分的綜合分析成為可能。本論文根據(jù)當(dāng)前中藥色譜指紋圖譜研究中的一些難點(diǎn)和熱點(diǎn)問題，利用聯(lián)用色譜儀器，結(jié)合能有效利用色譜和光譜/質(zhì)譜信息的化學(xué)計(jì)量學(xué)方法，實(shí)現(xiàn)對(duì)中藥及其生物樣品等復(fù)雜體系的定性定量分析。論文主要涉及四個(gè)方面：當(dāng)歸揮發(fā)

2、性和非揮發(fā)性化學(xué)成分的色譜指紋圖譜研究；色譜指紋圖譜技術(shù)用于當(dāng)歸化學(xué)成分在家兔體內(nèi)的吸收和代謝分析；當(dāng)歸補(bǔ)血湯復(fù)方及其單味藥的化學(xué)組分歸屬分析；當(dāng)歸補(bǔ)血湯復(fù)方及其單味藥治療家兔血吸蟲病肝纖維化的藥理藥效研究。 一、用GC-MS和HPLC-DAD-MS色譜指紋圖譜技術(shù)對(duì)當(dāng)歸的揮發(fā)性和非揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行了定性定量分析(第二章、第三章)。并采用直觀推導(dǎo)式演進(jìn)特征投影法(HELP)對(duì)重疊組分進(jìn)行分辨以獲取每個(gè)組分的純色譜和純光譜，從而

3、提高了組分定性和定量的準(zhǔn)確性。用HPLC-DAD-MS聯(lián)用儀器對(duì)當(dāng)歸的醇提化學(xué)成分進(jìn)行色譜指紋圖譜分析。通過(guò)解析化合物在APCI-MS和ESI-MS不同電離模式下的質(zhì)譜行為，可以比較容易地找到被測(cè)物質(zhì)的分子離子峰，從而確定其分子量。結(jié)合紫外光譜并與文獻(xiàn)報(bào)道的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)照，實(shí)現(xiàn)了當(dāng)歸中部分苯酞類物質(zhì)的初步定性分析。并為當(dāng)歸指紋圖譜數(shù)據(jù)庫(kù)的建立提供豐富的信息。 二、在中藥色譜指紋圖譜技術(shù)的基礎(chǔ)上，分析了當(dāng)歸中化學(xué)成分在家兔體內(nèi)的

4、吸收和代謝(第四章)。結(jié)合HPLC-DAD-MS聯(lián)用儀器和化學(xué)計(jì)量學(xué)方法，首次提出利用色譜指紋圖譜技術(shù)，通過(guò)對(duì)當(dāng)歸及灌胃當(dāng)歸前后兔血漿的色譜指紋圖譜的對(duì)比分析，可同時(shí)分析篩選當(dāng)歸中被吸收到家兔體內(nèi)的多種活性成分及血液中的代謝成分。并通過(guò)分析其進(jìn)入體內(nèi)活性成分的濃度消長(zhǎng)和變化，對(duì)血液中測(cè)定的各組分的生物活性進(jìn)行判斷和預(yù)測(cè)。本研究提示，色譜指紋圖譜技術(shù)可以用于同時(shí)分析中藥中多種成分在體內(nèi)的吸收代謝和藥代動(dòng)力學(xué)研究。 三、利用HPLC

5、-DAD提供的二維化學(xué)數(shù)據(jù)信息，結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法，對(duì)統(tǒng)一試驗(yàn)條件下的當(dāng)歸補(bǔ)血湯及其單味藥的色譜組分進(jìn)行了比較和歸屬分析(第五章、第六章)。在中藥各組分不完全清楚的情況下，利用聯(lián)用色譜儀器和光譜相關(guān)色譜方法，可以直接判斷中藥復(fù)方及其單味藥的不同流出色譜指紋圖譜中相關(guān)物質(zhì)歸屬，而不用對(duì)各色譜峰簇進(jìn)行組分分辨和化學(xué)定性，快捷實(shí)現(xiàn)中藥復(fù)方與單味藥化學(xué)成分比較研究和追蹤，對(duì)中藥復(fù)方的物質(zhì)組成和質(zhì)量控制以及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供一種快捷的比較方法。

6、 四、當(dāng)歸補(bǔ)血湯復(fù)方及其單味藥治療家兔血吸蟲病肝纖維化的藥理藥效研究(第七章)。首次發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸補(bǔ)血湯復(fù)方對(duì)家兔血吸蟲病肝纖維化有較好的治療效果。結(jié)合吡喹酮治療家兔血吸蟲病肝纖維化，用B超聲圖像評(píng)估當(dāng)歸、黃芪和當(dāng)歸補(bǔ)血湯治療血吸蟲病肝纖維化的效果。研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)血吸蟲病肝纖維化的治療作用優(yōu)于單味藥當(dāng)歸或黃芪。并對(duì)當(dāng)歸補(bǔ)血湯復(fù)方及其單味藥的化學(xué)成分用色譜指紋圖譜技術(shù)進(jìn)行了分析檢測(cè)。分析了當(dāng)歸補(bǔ)血湯復(fù)方與單味藥的歸屬。初步在色譜指