輔助檢查多發(fā)性骨髓瘤并發(fā)淀粉樣變生物標(biāo)志物的研究.pdf

1、目的:
　　多發(fā)性骨髓瘤并發(fā)淀粉樣變患者可以在骨髓內(nèi)形成淀粉樣變沉積，本研究首先建立一種利用骨髓涂片能夠檢查淀粉樣變的方法，以便鑒定多發(fā)性骨髓瘤患者并發(fā)骨髓淀粉樣變沉積，以上述研究結(jié)果為基礎(chǔ)，進(jìn)一步系統(tǒng)分析多發(fā)性骨髓瘤并發(fā)骨髓淀粉樣變以及骨髓淀粉樣變陰性患者的生物標(biāo)志物類型、表達(dá)水平變化特征。為輔助診斷多發(fā)性骨髓瘤并發(fā)骨髓淀粉樣變提供實(shí)驗室檢查標(biāo)志物和檢測方法。
　　方法:
　　首先，選擇天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院首先，選擇

2、多發(fā)性骨髓瘤診治患者和大致正常骨髓像患者。依據(jù)臨床體征、外周血細(xì)胞檢查和骨髓細(xì)胞瑞氏染色結(jié)合骨髓細(xì)胞組織化學(xué)染色、細(xì)胞染色體檢查和細(xì)胞免疫化學(xué)染色，診斷MM和大致正常骨髓象進(jìn)行有核細(xì)胞染色分析和觀察細(xì)胞形態(tài)。然后探索骨髓細(xì)胞進(jìn)行剛果紅染色條件，優(yōu)化后分別進(jìn)行利用H&E復(fù)染、瑞氏復(fù)色、蘇木素復(fù)染對于觀察淀粉樣變沉積的影響染色和骨髓有核細(xì)胞染色效果。
　　其次，臨床確定診斷MM患者44例，利用建立檢查骨髓淀粉樣變方法，對骨髓涂片剛果紅

3、染色結(jié)合偏振光，確定骨髓內(nèi)淀粉樣變沉積，將MM患者劃分為淀粉樣變陽性和陰性兩組。利用SYSMEX XE-5100血液分析儀，測定血液RBC數(shù)量、WBC數(shù)量、Hb含量和PLT數(shù)量含量。西門子BNⅡ特種蛋白儀測定血清IgA，IgG, IgM，κ和λ含量。HITACHI7600全自動生化分析儀和配套試劑，檢測血清LDH、LDH1、ALT、AST、mAST、ALP、GGT、CHE、ADA、AFU、GPDA、5-NT、TP、Alb、 Palb和G

4、lo等16項生物化學(xué)標(biāo)志物。常規(guī)生化項目。骨髓細(xì)胞瑞氏染色，依據(jù)細(xì)胞形態(tài)學(xué)對各種類型血細(xì)胞進(jìn)行分類計數(shù)，分析骨髓各計算各系統(tǒng)系幼稚與成熟細(xì)胞及骨髓瘤細(xì)胞的數(shù)量。
　　結(jié)果:
　　(1)骨髓細(xì)胞經(jīng)過單純?nèi)鹗先旧瑢τ泻思?xì)胞和RBC細(xì)胞胞漿染色效果良好，但對淀粉樣變無親和性，無法判斷是否有淀粉樣變沉積。(2)骨髓細(xì)胞淀粉樣變剛果紅染色后，結(jié)合瑞氏染色復(fù)染有核細(xì)胞，酒精脫水后細(xì)胞和結(jié)構(gòu)模糊和染色變淺。(3)淀粉樣變剛果紅染色后，蘇

5、木素復(fù)染酒精脫水后，骨髓有核細(xì)胞染色效果良好，同時淀粉樣變?nèi)旧黠@紫紅色，染色效果良好，容易判斷判讀清楚。
　　免疫比濁法測定血清中免疫球蛋白水平，發(fā)現(xiàn)MM患者并發(fā)發(fā)現(xiàn)骨髓淀粉樣變陽性患者，免疫標(biāo)志物IgG含量明顯低于陰性組，κ和λ含量均值有降低趨勢，但是未見有統(tǒng)計學(xué)差異。分析血清生物化學(xué)標(biāo)志物水平，發(fā)現(xiàn)骨髓淀粉樣變陽性患者血清LDH和LD-1活性明顯高于淀粉樣變陰性組，同時外周血白細(xì)胞計數(shù)及單核細(xì)胞計數(shù)也出現(xiàn)淀粉樣變陽性組高于陰

6、性組(p＜0.05)的情況，而TP、Alb、ALT、AST、血液RBC、HGB和PLT數(shù)量等指標(biāo)未見有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)論:
　　1.探討了骨髓檢查淀粉樣變的方法，確定骨髓涂片剛果紅染色后，利用蘇木素復(fù)染，后酒精脫色對有核細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色效果良好，建議蘇木素染色用于骨髓淀粉樣變檢查的復(fù)染方法。利用此方法可以在診斷多發(fā)性骨髓瘤的同時鑒別骨髓淀粉樣變，為進(jìn)一步找到輔助診斷多發(fā)性骨髓瘤并發(fā)骨髓淀粉樣變的實(shí)驗室標(biāo)志物奠定了技術(shù)基

7、礎(chǔ)。
　　2.比較發(fā)現(xiàn)多發(fā)性骨髓瘤并發(fā)骨髓淀粉樣變與骨髓淀粉樣變陰性患者體液免疫球蛋白IgA，IgG, IgM，κ和λ含量，只有體內(nèi)免疫球蛋白IgG含量明顯降低。
　　3.多發(fā)性骨髓瘤并發(fā)骨髓淀粉樣變患者外周血白細(xì)胞總數(shù)計數(shù)、單核細(xì)胞總數(shù)計數(shù)明顯增高，
　　4.分析血清LDH、LD-1、ALT、AST、mAST、ALP、GGT、CHE、ADA、AFU、GPDA、5-NT、TP、Alb、Palb和Glo等16項生物化學(xué)標(biāo)