吡格列酮、二甲雙胍對OLETF大鼠胰島素抵抗模型的IL-18及TLR4影響的研究.pdf

1、目的:本研究通過高脂飼料喂養(yǎng)OLETF大鼠建立胰島素抵抗(insulin resistance，IR)模型，測定相關(guān)的血清學(xué)炎性指標(biāo)IL-6，IL-18及TLR4，并用吡格列酮、二甲雙胍進(jìn)行藥物干預(yù)，目的是:1、觀察IR大鼠血清中IL-6，IL-18及TLR4水平的變化;2、檢測各組心肌組織中炎性受體TLR4表達(dá)量的變化;3、探討臨床常用的降糖藥物吡格列酮、二甲雙胍保護(hù)心血管系統(tǒng)的機(jī)制;4、比較吡格列酮、二甲雙胍在改善胰島素抵抗、保護(hù)心

2、血管效果方面存在的差異。
　　方法:4周齡SPF級雄性O(shè)LETF大鼠36只，同系同齡LETO(long-evans tokushimafatty)大鼠12只，體重約140-200g，用標(biāo)準(zhǔn)飼料在清潔環(huán)境中喂養(yǎng)4周。在8周齡時(shí)，給所有OLETF大鼠喂以高脂飼料，于28周齡時(shí)禁食12小時(shí)，檢測所有大鼠的空腹血糖(FBG)、血清胰島素(FINS)的水平，并計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)[HOMA-IR=(FBG×FINS)/22.5]和胰島素敏感指

3、數(shù)[ISI=Ln1/(FBG×FINS)]，判斷是否成功建立IR模型。將成功造模的IR大鼠隨機(jī)分為3組，模型組(O)12只繼續(xù)喂以高脂飼料，吡格列酮(P)組12只喂以吡格列酮(2mg/kg·d)加高脂飼料，二甲雙胍(M)組給予二甲雙胍（150 mg/kg·d）加高脂飼料，LETO大鼠12只作為對照(NC)組，一直給予標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)。藥物干預(yù)20周后再次禁食12小時(shí)，采用葡萄糖酶法測定FBG，放射免疫法測定FINS，全自動生化分析儀測定甘油

4、三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。采用雙抗體夾心ELISA法測定IL-18、TLR4，嚴(yán)格按照說明書操作，然后迅速處死大鼠，取出大鼠心肌組織放于凍存管中，并于-80℃冰箱中保存?zhèn)溆?，用WesternBlotting測定各組大鼠心肌組織中TLR4的表達(dá)。所有結(jié)果均采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理。
　　結(jié)果:1、各組間的FBG, FINS，HOMA-IR和ISI的對比:與

5、NC組相比，O組的FBG, FINS，HOMA-IR的水平顯著增高，ISI的水平也顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義; P組、M組與O組比較，F(xiàn)BG, FINS，HOMA-IR的水平顯著降低，ISI水平顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)。
　　2、各組血脂水平的比較:O組TC，TG, LDL-C水平明顯高于NC組，HDL-C水平明顯低于NC組;與O組相比，P組和M組的TC，TG, LDL-C的水平明顯降低，而HDL-

6、C的水平也明顯升高，差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)。
　　3、各組間大鼠血清炎性因子的比較:O組IL-6，IL-18，LR4水平明顯高于NC組，與O組相比，P組的血清IL-18，TLR4的水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與O組相比，M組的血清中IL-6，TLR4的水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而IL-18水平亦輕度降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　4、各組大鼠心肌組織中TLR

7、4蛋白表達(dá)量的比較:O組心肌組織中TLR4蛋白水平明顯高于NC組，P組與O組相比，心肌組織中TLR4蛋白水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)，M組與O組相比，心肌組織中TLR4蛋白水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論:1、與正常大鼠相比，胰島素抵抗大鼠血清中FBG, FINS，OMA-IR，TC，TG,LDL-C，IL-6，IL-18，TLR4水平明顯升高，ISI，HDL-C水平明顯降